蛋白质的二级结构主要有哪些类型.docVIP

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  • 2020-04-26 发布于河北
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蛋白质的二级结构主要有哪些类型,其特点如何? 答:α-右手螺旋,β-折叠,无规卷曲,U型回折(β-转角) 1α-右手螺旋 α-螺旋为右手螺旋,每一圈含有3.6个aa残基(或肽平面),每一圈高5.4?,即每一个aa残基上升1.5?,旋转了100度,直径为5 ?,2个二面角(ф,ψ)=(-570,-480)。维持α-右手螺旋的力量是螺旋内氢键,它产生于一个肽平面的C=O与相邻一圈的在空间上邻近的另一个肽平面的N-H之间,它的方向平行于螺旋轴,每个氢键串起的长度为3.6个肽平面或3.6个aa残基,被氢键串起来的这个环上含有13个原子,故α-右手螺旋也被称为3.613螺旋。Pro破坏α-螺旋。 2β-折叠 肽链在空间的走向为锯齿折叠状,二面角(ф,ψ)=(-119℃,+113℃)。维持β-折叠的力量是折叠间的氢键,它产生于一个肽平面的C=O与相邻肽链的在空间上邻近的另一个肽平面的 3U型回折:也叫β- 转角,肽链在某处回折1800所形成的结构。这个结构包括的长度为4个aa残基,其中的第三个为Gly,稳定该结构的力量是第一和第四个aa残基之间形成的氢键。 4无规卷曲:无固定的走向,但也不是任意变动的,它的2个二面角(ф,ψ)有个变化范围。 论述 04蛋白质 简述蛋白质一级结构的分析方法。 第一步:前期准备,第二步:肽链的端点测定,第三步:每条肽链aa顺序的测定,第四步:二硫键位置的确定。 ?1第一步:前期准备 ?分离纯化蛋白质:纯度要达到97%以上。 ?蛋白质分子量的测定:用于判断分子的大小,估计肽链的数目,有 渗透压法、 凝胶电泳法(聚丙烯酰胺、SDS)、 凝胶过滤法、 超离心法等 ?aa组成的测定:用于最后核对,氨基酸自动分析仪。 ? 肽链拆分:非共价键的如氢键、离子键、疏水键、范德华力4种,可用尿素或盐酸胍等有机溶液来拆分。共价键的仅二硫键1种,可用 巯基乙醇、碘代乙酸、过甲酸来 拆分。 ?2第二步:肽链的端点测定 ?N端测定: Sanger 法,DNFB→DNP-肽→水解→乙醚萃取→层析鉴定。 ? Edman 法,PITC→PTC-肽→PTH-aa→层析鉴定。 ?C端测定: 肼解法。 ?3第三步:每条肽链aa顺序的测定 事先要将蛋白质打断成多肽甚至寡肽,再上机分析,而且要2套以上, 便于以后拼接。 ?常用的工具酶和特异性试剂有: ? 胰蛋白酶:-(Arg、Lys)↓-。产物为C端Arg、Lys的肽链。 ? 糜蛋白酶:表示为-(Trp、Tyr、Phe)↓- 。 ? CNBr:-Met↓-。 4第四步: 二硫键位置的确定 包括链内和链间二硫键的位置,用 对角线电泳来测,这项工作在AA序测定完毕后进行。在肽链未拆分的情况下用 胃蛋白酶水解之,可以得到被二硫键连着的多肽 产物。先进行第一向电泳,将产物分开。再用巯基乙醇处理,将二硫键打断。最后进行第二向电泳,条件与第一向电泳完全相同。选取偏离对角线的样品(多肽或寡肽),它们就是含二硫键的片段,上机测aa顺序,根据 已测出的蛋白质的 aa 顺序,把这些片段进行定位,就能找到二硫键的位置。 以B-DNA和tRNA为例叙述核酸的二级结构模型。 答:一.Watson-Creck的DNA二级结构模型(B-DNA,线状DNA,自然选择): 美国Watson 、英国Creck提出: 1DNA分子是由2条DNA单链互相缠绕而成,2条链反向平行(一条链为5’→ 3’,另一条链为 3’→ 22条链靠链间的H键结合,H键的产生于碱基之间,符合碱基配对原则:A=T,G=C。右手螺旋的维持力主要是碱基堆积力,其次是氢键。 3DNA的骨架为磷酸和脱氧核糖,在分子外面,戊糖平面∥螺旋轴,DNA的侧链基团是碱基,在分子内部,碱基平面⊥螺旋轴。螺距34?,直径20?,10bp/圈。分子有一条宽沟称为大沟,还有一条窄沟叫小沟,复制和转录的有关酶就是付在大沟之处的。 4遗传信息储存在DNA分子的bp序中。 5意义:能够解释DNA的一切物理化学性质;实现了DNA的结构与生物功能之间的统一:精确的自我复制。 二. RNA的二级结构模型 RNA的二级结构通式:茎环结构:RNA局部双螺旋,符合A-DNA模型。 tRNA的二级结构模型 三叶草模型: AA臂:其3’ 功能:携带AA 二氢尿嘧啶环:含有二氢尿嘧啶,稀有碱基 反密码环:具有反密码子,可以和mRNA上的密码子配对,将携带的AA送到恰当的位置 额外环:显示tRNA特异性的地方,是tRNA分类的依据。 TψC环:含有稀有碱基T(本应该在DNA中的)、假尿苷ψ 用化学渗透学说阐述氧化磷酸化的机制 1要求线粒体的内膜封闭完好,呼吸链中的电子载体和质子载

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