环境生物技术2(3)-现代生物技术与环境污染治理(司)合集.ppt

酶提取 生物材料的破碎：机械法、物理法、化学法、酶解法 酶的提取：相似相溶，酸、碱、盐溶液，有机溶剂 沉淀：盐析法、PEG沉淀法、有机溶剂沉淀法、等电点沉淀法、热处理沉淀法等 层析：利用混合物中各组分的物理化学性质不同，使各组分在两相中的分布程度不同而达到分离。包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析、高效液相色谱层析等 电泳：由于蛋白质分子表面电荷的差异，可用电泳方法将其分离开来。常用的区带电泳有聚丙烯酰胺凝胶电泳和等电点聚焦等 演示课件 酶固定化 游离酶的稳定性差，且不利于其和目标产物分离和回收利用，固定化技术应运而生 固定化酶是指固定在载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶，其既保持了酶的活性，又可反复使用，且易于分离 固定化方法包括吸附法、结合法和包埋法 固定化方法 演示课件 酶反应器 以酶为催化剂进行反应所需要的设备称为酶反应器 根据反应类型、动力学性质、反应器类型和流体流动状态、热传递及温度的影响、生产量和工艺流程、操作稳定性等选择适当的反应器 反应器的设计目标应该达到：容积生产率高、条件易控制、耗能低、污染少、反应器加工简便 酶反应器的类型 演示课件 2 酶工程在环境污染治理中的应用 腈化物降解酶 氨氧化酶 酶在废水处理中的应用 含芳香族化合物废水处理 造纸废水处理 含氰（腈）废水处理 食品加工废水处理 酶在土壤修复中的应用 演示课件 2.1 腈化物降解酶 腈化物是指含有腈基的有机化合物（R-CN），是重要的化工原料，但其也具有强烈的生物毒性、致癌性和致突变性，因此是一种急需治理的有机污染物 采金矿使用量大。 腈化物酶催化转化的产物 R和R‘分别代表烷基和芳基 演示课件 腈化物降解酶的分布及应用 包括腈化物水解酶、腈化物水合酶和酰胺酶，细菌中常见，植物和真菌中少见，可利用腈化物为唯一碳源和氮源进行代谢，微生物代谢机理尚不完全清楚 已应用于腈化物的生物转化以及腈化物污染环境的生物修复等领域 演示课件 腈化物的酶水解途径 腈化物的酶水解通过两条途径进行 腈化物水解酶直接水解腈化物，形成相应的有机酸和氨 腈化物水合酶催化有机腈水合，形成中间产物酰胺，然后在酰胺酶的作用下转化为相应的有机酸和氨 演示课件 腈化物水解酶 可将腈化物直接水解成有机酸和氨 是一个可溶性的金属酶，在催化活性部位含有一个非血红素铁原子或非类可啉钴原子，此外还含有相对分子质量约为23 000的两个亚基，几乎都以杂四聚体形式存在 一些铁类的腈化物水解酶的活性受光调节——“光复活”的作用机制 根据底物专一性可分为：芳香腈水解酶、杂环腈水解酶和脂肪腈水解酶 演示课件 腈化物水合酶 可将腈化物转化为酰胺 是含有钴和铁的金属酶 可能的反应机理 腈化物接近与金属结合的氢氧根离子，该离子作为亲核试剂进攻腈化物的碳原子 与金属结合的氢氧根离子作为一般的碱，激活水分子，然后进攻腈化物中的碳原子，形成酰亚胺，最终重排成酰胺 演示课件 2.2 氨氧化酶 硝化反应是氮循环的重要步骤，氨氧化过程是其限速步骤 氨氧化细菌属于专性化能自养菌，从氧化NH4+为NO2-的过程获得能量，利用CO2为碳源进行细胞合成 NH4+氧化为NO2-的过程经过两个步骤 氨单氧合酶（AMO）催化的反应： 2H++NH4++2e-+O2→NH2OH+H2O+2H+ 羟胺氧化还原酶（HAO）催化的反应： NH2OH+H2O→HONO+4e-+4H+ 演示课件 2.3 酶在废水处理中的应用 酶法处理污染物与生物法相比的优势： 可以处理生物难降解化合物 可以处理各种浓度污染物，尤其是低浓度有机污染物 可以在各种pH/温度/盐度环境下使用 不存在冲击负荷效应 不存在与生物生长及其适应相关的滞后效应 不产生污泥 过程控制简易 演示课件 含芳香族化合物废水处理 芳香族化合物，包括酚（如：激素，类激素）和芳香胺，属于优先控制污染物。 很多酶可用于芳香族化合物废水处理 酶具有高度选择性，能处理低浓度废水 不易被有生物毒性的物质所抑制 可在较大浓度范围内发挥作用 停留时间较短 演示课件 过氧化物酶 是微生物或植物产生的一类氧化还原酶，在过氧化物的激活下，才可用于氧化底物 辣根过氧化物酶（HRP）：是酶处理废水领域中应用最多的一种酶，可催化多种芳香族化合物，包括酚/苯胺/联苯胺/及其异构体等，反应产物是沉淀，易去除，pH值和温度范围较广 木质素过氧化物酶（LiP）：可处理很多难降解芳香族化合物和多环芳烃、酚类物质，稳定性是其应用的关键，固定化是有效方法 植物来源的酶 演示课件 过氧化物酶 属于另一类能够催化酚类物质氧化的氧化还原酶 酪氨酸酶，也叫酚酶或儿茶酚酶，催化两