分子生物学-转录课件.pptVIP

5? pppGp… 5? GpppGp… 5? m7GpppGp… 甲基转移酶 SAM 帽子结构的生成 5? ppGp… （磷酸酶） Pi 加帽酶 pppG ppi （鸟苷酸转移酶） 加帽酶 演示课件 m7Gppp m7GpppN1mp 演示课件 m7GpppN1mpN2mp 演示课件 帽子结构功能： (1)保护mRNA免受核酸酶水解 (2)与帽结合蛋白质复合体结合，并参与mRNA 和核糖体的结合，与翻译起始有关 (3)与mRNA向核外的转运有关 　　(4)增强mRNA剪接效率 演示课件 　 尾结构：polyA 　　加尾过程：先由核酸外切酶切去3? 末端一些过剩的核苷酸，然后加入polyA （二）前体mRNA在3’端特异位点断裂并加上多聚腺苷酸尾 演示课件 多聚腺苷酸聚合酶（poly(A) polymerase, PAP） 演示课件 利用polyA纯化mRNA 演示课件 尾功能：（1）保护RNA，防止被水解 　 　　　 （2）与翻译起始有关 （3）与mRNA向核外的转运有关 注意：并不是所有基因的转录产物都有polyA尾。 演示课件 断裂基因（外显子和内含子） hnRNA 二次转酯反应 （三）hnRNA 的剪接 snRNA, 剪接体 演示课件 1993年诺贝尔生理学或医学奖得主 罗伯茨????Richard J. Roberts美国贝弗莉新英格兰生物实验室????1943年-- 夏普 ??Phillip A. Sharp?美国麻省理工学院癌症研究中心????1944年-- 演示课件 原核生物的边转录边翻译电镜照片 演示课件 识别转录起始部位。 与模板链结合，并使DNA双链打开。 催化NTP的聚合。 缺乏外切酶活性,无校对功能。 不同的?识别不同的转录起始位点。 RNA聚合酶作用特点 演示课件 依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 （三）转录终止 指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 分类 演示课件 1. 非依赖 Rho因子的转录终止 DNA模板上靠近终止处，有些特殊的碱基序列，转录出RNA后，RNA产物形成特殊的结构来终止转录，这种方式较普遍。 演示课件 反向重复序列与发夹 Inverted repeats and hairpins 5’NNGAATGCCNNNGGCATTCNN3’3’NNCTTACGGNNNCCGTAAGNN5’ 5’NNGAAUGCCNNNGGCAUUCNN3’ 演示课件 茎环/发夹结构 演示课件 茎环结构使转录终止的机理 使RNA聚合酶变构，转录停顿； 使转录复合物趋于解离，RNA产物释放。 5′pppG 5? 3? 3?5? RNA-pol 演示课件 A T P 2. 依赖 Rho因子的转录终止 相对少见，主要见于噬菌体。 演示课件 Rho factor: ATPase activity helicase activity 易与polyC结合 演示课件 真核生物的转录过程 The Process of Transcription in Eukaryote 第三节 演示课件 （一）转录起始前的上游区段 不同物种、不同细胞或不同的基因，转录起始点上游可以有不同的DNA序列，但这些序列都可统称为顺式作用元件(cis-acting element)。 一、真核生物的转录起始过程 真核生物的转录起始上游区段比原核生物 多样化，转录起始时，RNA-pol不直接结合模板，其起始过程比原核生物复杂。 演示课件 顺式作用元件包括启动子、启动子上游元件(upstream promoter elements)或promoter-proximal elements)等近端调控元件和增强子(enhancer)、沉默子等远隔序列。 演示课件 一个典型的真核生物基因上游序列: 5’ 3’ 调控序列 TATA盒 Inr YYAN YY T A -30 +1 TATAAA 　　　起始点上游多数有共同的TATA序列，称为Hognest盒或TATA盒(TATA box)。 TATA盒和Inr一起通常被称为核心启动子。 演示课件 TATA盒的作用在于决定转录的起点，序列的改变会使转录位点偏移；缺失TATA盒，转录将在许多位点上开始。 TATA盒决定转录的效率： 如鸡蛋清蛋白