猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA.docVIP

兽用 猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA 兽用 抗体检测试剂盒使用说明书（阻断法） 【兽用名称】 通用名：猪伪狂犬病病毒gE蛋白ELISA抗体检测试剂盒 商品名：无 英文名：ELISA Kit for detection of antibody against Pseudorabies virus gE glycoprotein 汉语拼音：Zhu Weikuangquanbingdu gE danbai ELISA Kangtijianceshijihe 【主要成分与含量】 （1） 猪伪狂犬病毒gE蛋白ELISA抗原包被板 2板（96孔/板） （2） 阴性对照血清（蓝色盖子） 1管（2ml/管） （3） 阳性对照血清（红色盖子） 1管（2ml/管） （4） 酶标记物（蓝色盖子） 1瓶（20ml/瓶） （5） 样品稀释液（黄色盖子） 1 瓶（50ml/瓶） （6） 底物液A（红色盖子） 1 瓶（10ml/瓶） （7） 底物液B（黑色盖子） 1 瓶（10ml/瓶） （8） 终止液（蓝色盖子） 1 瓶（10ml/瓶） （9） 20倍浓缩洗涤液（白色盖子） 1瓶（30ml/瓶） （10） 血清稀释板 2板（96孔/板） （11） 说明书 1份 【作用与用途】 用于伪狂犬病病毒gE缺失疫苗免疫猪与自然感染猪的鉴别诊断。 【样品制备】 取动物全血，按常规方法制备血清，要求血清清亮，无溶血。 【洗涤液配制】 使用前，浓缩的洗涤液应恢复至室温（20～25℃），并摇动使沉淀溶解（最好在37℃水浴锅中加热5～10分钟），然后用蒸馏水作20倍稀释（例如：30ml的浓缩洗涤液加上570ml蒸馏水），混匀，稀释好的洗涤液在2～8℃可以存放7日。 【样品和对照稀释】 样品稀释：在血清稀释板中按1:1的比例稀释（例如：100μl样品稀释液中加100μl待检血清）。 对照稀释：在血清稀释板中按1:1的比例稀释（例如：120μl样品稀释液中加120μl对照血清）。 【操作步骤】 1.取抗原包被板（根据样品多少，可拆分多次使用），分别将稀释好的待检血清样品和对照血清各取100μl加入到抗原包被板孔中。同时设2孔阴性对照、2孔阳性对照，轻轻振匀孔中样品（勿溢出），置37℃下孵育45 2.弃去孔中的液体，每孔加入200μl洗涤液，每次静置3分钟弃去洗涤液，并在吸水纸上拍干，共计洗板5次。 3.每孔加酶标记物100μl，置37℃下孵育20 4.洗涤5次，方法同2。 5.每孔加底物液A和底物液B各1滴（约50μl），混匀，室温（20~25℃）避光显色15 6.每孔加终止液1滴（约50μl），混匀后10分钟内测定结果。 【结果判定】 在酶标仪上测各孔OD630nm值。试验成立的条件是阴性对照孔平均OD630nm值与阳性对照平均OD630nm值之差≥0.3。 S=样品孔OD630nm值，N=阴性对照孔平均OD630nm值。 若S/N比值≤0.35，样品判为gE抗体阳性。 若S/N比值≤0.4但＞0.35，样品判为可疑。该样品必须重测，如结果相同，则判为gE抗体阳性。 若S/N比值＞0.4，样品判为gE抗体阴性。 注意：用620~650纳米波长测定结果均有效。 【注意事项】 （1） 试剂盒使用前各试剂应平衡至室温。使用后放回2~8℃保存。 （2） 不同批号的试剂盒组份不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。 （3） 底物液和终止液不能暴露于强光或接触氧化剂。 （4） 待检血清样品数量较多时，应先稀释完所有待检血清，再加到抗原包被板上，使反应时间一致。 （5） 稀释20倍浓缩洗涤液时，如发现有结晶，应加热使其溶解后再使用。 （6） 移液时，应尽量准确，防止产生气泡。 （7） 应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。 【规格】 192孔/盒 【批准文号】 兽药生字（2011）170048112 【贮藏与有效期】 2~8℃保存，有效期为6个月。 仅供兽医诊断使用 武汉科前动物生物制品有限责任公司 地址：武汉市洪山区狮子山街1号 邮编：430070 技术服务电话 销售与传真电话：027 网址：