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年分子生物学实验技术实验内容一一总的提取实验安排每两人抽提一管为了使操作同步以节省时间各组样品请一起离心操作步骤苯冰预冷的液体样品加入管中再加入将酚和异硫氰酸胍的混合物将样品剧烈混合后在室温放置加入氯仿颠倒管混和两次并剧烈振荡混和在条件下以离心将上层水相转移到一个新的管中加入等体积的异丙醇并混匀然后在放置至少在条件下以离心后小心并尽可能地去除全部上清夜用乙醇洗涤沉淀和管壁将沉淀进行干燥不能完全干燥处理后用无污染的水将溶解并于保存注意事项所有的玻璃器皿均应在使用前于的高温下干烤或更长时间所用的塑料
2006年《分子生物学实验技术》实验内容
一、RT-PCR
(一)总RNA的提取
实验安排:
每两人抽提一管。为了使操作同步以节省时间,各组样品请一起离心。
操作步骤:
TM(苯冰预冷的900μlLS-Biotragents液体样品加入1.5ml Ep管中,再加入1、将100μl酚和异硫氰酸胍的混合物)。
2、将样品剧烈混合后,在室温放置5min。
3、加入200μl氯仿,颠倒Ep管混和两次,并剧烈振荡混和10s。
4、在4℃条件下,以10000×g离心15min。
5、将上层水相转移到一个新的Ep管中,加入等体积的异丙醇(Isopropanol)并混匀,然后在4
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