囊泡库的循环·综述2013稿件.6稿件.24稿件.pptVIP

目前数据都支持SNARE是最好的触发融合的因子，但是使膜靠得更近或许要被别的细胞机制所取代 除了synaptobrevin，囊泡还存在具有Qb基序的SNARE蛋白Vtilaβ，它在内吞体和高尔基体的融合反应中起作用，不需要与synaptobrevin作用，说明复合体的形成并不是都一定要SNARE基序介导 钙结合到synaptotagmin（Syt）触发的融合 快速的胞吐涉及到钙结合到钙感受蛋白上，Syt1和Syt2是作为钙的感受蛋白的囊泡蛋白 synaptotagmin（Syt） Syt由一个短的胞内氮端序列，一个单次跨膜区，一个短的连接区和两个C2区（the C2A and C2B domains）组成。Syt1和Syt2有高度相似的序列，但他们与钙的结合能力不同，相差了2倍。 Syt1对于快速胞吐是必须的 Syt1KO mice产生一个致命表型，该表型包含了钙激发的快速胞吐的消失 C2A的突变改变了Syt1与快速胞吐的钙结合力 Syt1的C2A，C2B可以分别结合3,2个钙，他们在平时与钙的结合力差，但是当C2结构域结合到磷脂时与钙的结合力会攀升 Syt1的活动机制 Syt1能够部分钙依赖性的与SNARE结合，是否钙依赖的Syt1与SNARE的结合对于钙触发的胞吐是必须的？ Sr2+能够取代钙触发胞吐，但它无法使SNARE与Syt1结合，因此，即使SNARE与Syt1不结合，细胞也会发生胞吐 非依赖钙的Syt1与SNARE的结合的作用： 1，在融合孔打开之前，SNARE复合体组装之后能使Syt1与SNARE复合体靠得更近 2，招募更多的囊泡到RRP SNARE，Syt，complexin的囊泡胞吐模型 SNARE复合体的形成促使囊泡与前膜形成一个不稳定的融合态，可通过complexin结合到SNARE复合体而变得稳定，Syt1可在缺乏钙的情况下结合到SNARE，但是一旦结合钙，就会迅速结合到磷脂膜上，使融合中间体不稳定，于是打开融合孔 非同步释放的钙感受蛋白 Syt家族中的Syt3,6,7等成员可以作为胞吐慢成分的钙感受蛋白，他们有很强的钙亲和力，可以在低钙浓度下触发非同步释放 Rab3对胞吐的调节 Rab蛋白形成一个大的GTP结合蛋白家族，它们可以调控细胞内的运输。 突触囊泡至少包含3个Rab家族的成员：Rab3，Rab5和Rab11，而Rab3A占了所有Rab蛋白的25% 囊泡库的循环 葛建龙 2013-6-24 神经递质释放和突触囊泡循环 囊泡库及其可塑性 突触囊泡以及其和其他对象相互作用的分子结构 突触囊泡摄取神经递质 胞吐时的膜融合及调控 SV2s对钙浓度水平的调节 突触蛋白对囊泡库的调控 神经递质释放和突触囊泡循环 钙诱导的神经递质释放 钙内流触发快速的同步释放和慢速的非同步释放 花萼状突触：研究在一个动作电位就能触发的同步释放的最好例子 花萼的terminal有600个突触连接，而一个动作电位就能触发200个突触连接产生释放 钙电流开始于动作电位的峰值之前，并在完全再极化之前结束 钙内流导致胞内0.5ms左右的浓度瞬变，使动作电位和囊泡释放之间只有一个短暂的延时（0.05ms-0.5ms），然后钙很快消散，能及时阻止囊泡的继续释放 需要多少的钙能导致释放？ 1μM:难以观察 1-2μM：可以测量 20μM:饱和 因此钙高效快速的结合到钙感受蛋白是很有必要的 依赖钙的释放的假说 Bollmann：一个动作电位产生一个大致的钙离子瞬变持续时间的高斯分布，瞬变的平均持续时间为0.4ms，平均每一个待释放囊泡（pool size = 800 vesicles）处于9um浓度的钙环境中，并有25%的释放概率 现在更多的研究表明：释放与钙离子浓度呈线性关系 钙通道如何被组织？ EGTA阻断50%释放：大多数囊泡并不连在钙通道上 囊泡在活性区随机成簇分布，囊泡离钙通道距离30-300nm不等 不同的囊泡不同的释放概率，但不能排除囊泡异质性影响释放概率的可能性 钙与钙感受蛋白的结合导致融合孔打开 钙触发的快速释放预示着钙结合到钙感受蛋白仅仅触发融合孔的打开而不是复杂的级联效应 融合孔的开放概率决定于相应细胞膜的张力和构成：高渗和拉伸细胞膜都影响了神经递质的释放 突触小泡内吞与循环 胞吐之后的内吞能有多块？ 单个囊泡胞吐（自发放）后的内吞回收τ值约56ms 一个或低频率的多个动作电位导致的约两百或上千囊泡释放后的τ值约115ms At 20Hz或333Hz的τ值分别为2.3s和8.3s 刺激的频率增加内吞速率显著减慢，