微生物检验实验室气单胞菌属检验标准操作规程.doc

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微生物检验实验室气单胞菌属检验标准操作规程 1.概述 气单胞菌属包括嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌等,临床上嗜水气单胞菌最为常见。 2.标本类型 血液、痰、粪便等标本。 3.鉴定 3.1形态与染色 革兰阴性杆菌。 3.2培养特性 在血琼脂平板上35℃培养18~24小时,呈灰白色或淡灰色菌落,有狭窄的β溶血环。在麦康凯琼脂上呈无色、半透明菌落。 3.3生化反应 氧化酶试验阳性;发酵葡萄糖、蔗糖、L-阿拉伯糖,产酸产气,不发酵乳糖;TSI为K/A;七叶苷、精氨酸双水解酶、赖氨酸脱羧酶和硝酸盐还原试验均阳性;O/129耐药。 3.4鉴别要点 3.4.1 本菌属特征 氧化酶试验阳性,发酵葡萄糖、L-阿拉伯糖等多种糖类,硝酸盐还原试验阳性,鸟氨酸脱羧酶试验阴性,O/129耐药。 3.4.2 气单胞菌属种间鉴别见表5-42 表5-42 气单胞菌属鉴别的关键性试验 菌种 VP 赖氨酸 精氨酸 鸟氨酸 蔗糖 甘露醇 头孢噻吩 豚鼠气单胞菌 - - + - + + R 嗜水 + + + - + + R 简氏 + + + - - + R 舒 V V + - - - S 尺骨 - + + - V + R 维罗纳气单胞菌温和变种 + + + - + + S 维罗纳气单胞菌维罗纳变种 + + - + + + S 注:“+”为90%以上菌株阳性,“-”为90%以上菌株阴性,“V”为11%~89%菌株阳性,“S”为敏感,“R”为耐药。 3.5 操作步骤 3.5.1 氧化酶试验 参见《氧化酶试验标准操作规程》 3.5.2 鉴定 从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。 4.质控 参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。 5.质量控制 见《质量管理程序》 6.检验结果解释与分析 大多数气单胞菌产生β-内酰胺酶,对青霉素、氨苄西林、羧苄西林、替卡西林耐药,但对广谱的头孢菌素、氨基糖苷类、氯霉素、四环素、甲氧苄啶-磺胺甲噁唑和喹诺酮类药物敏感。 7.临床意义 气单胞菌为水中常居菌,可引起人类肠内感染和肠外感染,为引起夏季腹泻的常见病原菌。肠内感染主要表现为腹泻(水样便,严重出现痢疾样脓血便),肠外感染主要为菌血症、伤口感染、心内膜炎、脑膜炎等疾病。 8.鉴定流程 仪器鉴定或手工生化鉴定并做药敏试验 仪器鉴定或手工生化鉴定并做药敏试验 氧化酶试验阳性 麦康凯平板菌落呈无色、半透明 菌菌落 粪便、痰等 气单胞菌属 参考文献 1] 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23;2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.2008 [2] 周庭银编著. 《临床微生物学诊断与图解》.第二版.上海:上海科学技术出版社,2007 [3] 叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京:东南大学出版社,2006 [4] MurrayPR.Manual O/F Clinical Mircrobilogy.9th ed.Washington:ASM Press,2007 [5] ISO 15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007 (周庭银) 编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人:

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