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选修 1 生物技术实践 专题 34 微生物的培养与应用 基础知识点复习 遵化市堡子店中学生物组 王海泉 基础自主复习 1 回扣教材 自主梳理 夯实基础 一、微生物的培养 1 ． 培养基 (1) 概念：人们按照微生物对① 的不同需求，配制出的供其② ____________ 的营养基质。 (2) 营养构成 ? ? ? ? ? 1 ? 一般都含有③ ____ 、④ _____ 、⑤ _____ 、⑥ _______ 2 ? 还需满足不同微生物对 pH 、⑦ _______________ 以及⑧ _________ 的要求 营养物质 生长繁殖 水 碳源 氮源 无机盐 特殊营养物质 氧气 (3) 种类： 按物理性质分 ? ? ? ? ? ⑨ ______ 培养基：配制成液体状态的基质 加入⑩ ________ ：琼脂 ? _________ 培养基：配制成固体状态的基质 据化学成分分 ? ? ? ? ? ? ? ? ______ 培养基：由化学成分不明确的天然成分配制 成的培养基 ? _______ 培养基：由化学成分已知的化学物质配制成 的培养基 液体 凝固剂 固体 天然 合成 据培养用途分 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? _______ 培养基：能够让特定的微生物生长，抑制其 他微生物的生长，从而将所有需要的微生物从混 杂的微生物群体中分离出来的培养基 ? _______ 培养基：利用微生物代谢产物与指示剂的显 色反应快速鉴别不同微生物的培养基 选择 鉴别 2 ． 无菌技术 (1) 消毒 ? ? ? ? ? ? ? ? ? 特点：使用较为 ? _______ 的物理或化学方法仅杀死 物体表面或内部一部分对人体 ? ________________ ? 不包括 ? ______ 和 ? _______ ? 常用方法： ? ___________ 、 ○ 21 ____________ 、化学药剂 消毒法 温和 有害的微生物 芽孢 孢子 煮沸消毒法 巴氏消毒法 ? 3 ． 微生物培养的基本技术 ? (1) 配制培养基：称量 → 混合 → 溶化 → 调 pH→ 分装 → 包扎。 ? (2) 灭菌：加水 → 加培养基 → 密封 → 排冷气 → 维持压力 → 取出倒 平板 ( 或搁置斜面 ) 。 (4) 培养：接种后的培养皿放入恒温箱内培养。 ? 二、微生物的利用 ? 1 ． 菌种保藏 ? (1) 临时保藏 (2) 长期保存法： ○ 36 _________ 法，放在 ○ 37 _________ 下保存。 甘油管藏 － 20 ℃ ? 2 ． 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 (2) 统计菌落数目 ? ? ? ? ? ? ? 方法 ? ? ? ? ? 稀释涂布平板法 显微镜直接计数 计算公式： C V × M 3 ． 分解纤维素的微生物的分离 —— 纤维素分解菌的筛选 (1) 纤维素酶的组成及作用 a ．组成：一种 ○ 42 _____ 酶，它至少包括三种组分，即 ○ 43 ___________________ ________ 。 b ．作用 纤维素―― → C 1 酶 C X 酶 ○ 44 __________ 葡萄糖苷酶 , ○ 45 __________ 。 (2) 筛选方法 a ．方法： ○ 46 ____________ 法，即通过是否产生 ○ 47 ______ 来筛选纤维素分解菌。 b ．培养基：是以 ○ 48 _____________ 为唯一碳源的选择培养基。 复合 C 1 酶、 C X 酶和葡萄糖 苷酶 纤维二糖 葡萄糖 刚果红染色 透明圈 纤维素粉 (3) 筛选流程 土壤取样→ ○ 49 __________ → ○ 50 ___________ →将样品涂布到 ○ 51 _______________ 的培养基上→挑选 ○ 52 _______________ 的菌落。 选择培养 梯度稀释 鉴别纤维素分解菌 产生透明圈 考点分类透析 2 解读考点 拓展升华 直面高考 ? 一、微生物的营养要素及培养基配方 ? 基本营养要素：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐。此外 还要满足不同微生物生长对 pH 、特殊营养物质以及氧气的需求。 考 点 1 微生物的实验室培养 营养要素 来源 功能 无机 碳源 CO 2 、 NaHCO 3 、 CaCO 3 等含碳无机 物 碳 源 有机 碳源 糖类、脂质、蛋白质、有机酸、石 油、花生粉饼等 ①构成细胞中的物质和一些代谢 产