农业转基因生物抽制样与检测技术农业部甘蔗质检中心陈平华1013 43页资料.pptVIP

转基因植物及其产品抽制样注意事项 ? 严格防止交叉污染： 一次性手套、一次 性取样用品、一次性分样用品、一次性 盛装用品 ? 抽样量： 必须达到规定的最低质量 ? 均一性： 抽制样方法 ? 留备样： 与送检样性质相同 抽样报告 抽样报告应真实反映现场抽样工作过程和货物状况，包括以下内容 货物名称 货物包装形式和包装状况，标记情况 交付批数量或质量 分批方法及质量 抽样方法，包括抽样件数等 样品编号 抽样时间 抽样现场的环境状态及现场检验情况 抽样人的标识 任何发现的异常情况 农业转基因生物抽制样 与检测技术 陈平华 农业部甘蔗及制品质检中心转基因检测室 福建农林大学甘蔗所 内容提纲 ? 我省转基因送检样品存在的问题 ? 农业转基因生物抽制样的特点 ? 抽样和制样的基本要求 ? 转基因植物及其产品抽样和制样 ? 转基因检测技术 ? 试纸条快速检测现场示范 一、 我省转基因送检样品存在的问题 ? 问题： 1 、样品量差异大： 几十克 - 几百克 2 、包装不规范： 塑料包装袋、纸质袋，只有代号或名称 3 、不注意防止污染： 密封性不够 4 、二次送样现象： 对一次检测结果存疑 ? 后果：检测结果误差大； 追溯性差； 假阳性风险； 成本增加 …… 二、农业转基因生物抽制样的特点 1 、农业转基因生物抽制样是否遵循抽制样的基本理论？ 是，以数理统计学和概率论为理论基础建立起来，基本的抽样方法同样适用：单 纯随机抽样、系统抽样、分层抽样等 2 、农业转基因生物抽制样与其他种类的抽制样相同吗？ 与其他单纯以重量为基础的抽样有较大区别，特点： 1 、转基因检测以遗传物质 DNA 为模板，抽制样是以生物最小遗传单位为基础，与种子颗粒大小密切相关。 2 、样本大小根据二项分布、转基因限量水平和颗粒重计算获得： P(0)=(1-P) n ， P (0): 假阴性结果的可能性； P ：转基因含量， n ：检测样本中颗粒数量，假设： GMO 0.1% 样本 3000 粒 则 P(0)=0.0497 （ 0.05 ）置信度 =1- P(0)=95% 。 3 、防止污染是重中之重： 转基因检测灵敏度高： PCR 产物的生成量是以指数方 式增加的，能将 皮克 (pg=10 -12 g) 量级的模板扩增到微克 (ug=10 -6 g) 水平。能在 一个试管内将所要检测的 目的基因 或某一 DNA 片段于数小时内扩增至十万乃至百 万倍，能从 100 万个细胞中检出一个 靶细胞 ；在病毒的检测中， PCR 的灵敏度可 达 3 个 RFU( 空斑形成单位 ) ；在 细菌学 中最小 检出率 为 3 个细菌。 抽取不同批次样品要用不同抽样器材，盛放样品容器或包装一次性使用（ GB19495.7-2019 ） 三、抽样和制样的基本要求 ? 抽样的重要性： 通过部分了解整体；减少资源浪费；节省时间，提高效率； 保存检测对象的价值（毁灭性质的抽样，必须用抽样检查）。 ? 抽样方法根据抽样对象确定： 抽样方法依据 数理统计和概率论建立，不同 种类物质遵循统计学原理不同。抽样对象种类多样：形态上有固态、液态和气 态，组分上有均匀和不均匀批，还有原始材料和加工产品等。显然对于不同的 分析对象和分析要求，分析前试样的采集及制备也是不同的。因此采样及制备 样品的具体步骤应根据分析的要求、试样的性质、均匀程度、数量多少等等来 决定。一般情况下，经常使用随机采样和计数采样的方法。 ? 抽样方法十分重要： 采样误差常大于分析误差，因此，掌握采样和制样的一 些基本知识是很重要的，如果采样和制样方法不正确，即使分析工作做得非常 仔细和正确也是毫无意义的 , ，有时甚至给生产科研带来严重的后果。 抽样的基本目的和注意事项 ? 基本目的 : 从被检的总体抽样对象中取得有代表性的样品，通过对样品的检 测，得到在容许误差内的数据，从而求得被检抽样对象总体的某一或某些特性 的平均值及其变异性。 ? 注意事项： 采样前 ，应调查抽样对象的货主、来源、种类、批次、生产日 期、总量、包装堆积形式、运输情况、贮存条件、贮存时间、可能存在的成分 逸散和污染情况，以及其他一切能揭示抽样对象发生变化的材料。 采样时， 选择不与样品发生化学反应的材料制成的采样器。如果采样时间较长 ，中间样品用气密容器保存。盛样容器要依分析项目和被检抽样对象的性质而 定。 采样后