转基因抗虫棉叶围细菌种群动态变化及其分子鉴定.docVIP

转基因抗虫棉叶围细菌种群动态变化及其分子鉴定 邓 欣1，2，赵廷昌1，高必达2，王 振1，孙福在1 （1中国农业科学院植物保护所/植物病虫害生物学国家重点实验室，北京 100094；2湖南农业大学生物安全学院，湖南长沙 410128） 摘要：【目的】研究转基因抗虫棉叶围细菌的种群动态变化，并鉴定主要的细菌种群。【方法】采用常规培养的方法与RISA法相结合，分析转基因抗虫棉花33B、SGK321和GK12、受体棉花33、石远321和泗棉3号的叶围细菌在整个生育期的种群动态变化，并对主要细菌种群的ITS序列进行克隆测序，与数据库的序列进行比对鉴定细菌。【结果】6个棉花品种的叶围细菌的数量和群落多样性指数随着时间的变化，同一棉花品种不同采样时间之间差异显著，而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间的差异较小。用RISA法分析棉花叶围细菌群落结构，能够得到清晰的指纹图谱，图谱表明叶围细菌群落结构复杂，多样性丰富，聚类分析结果表明，叶围细菌群落变化与棉花品种无相关性。从棉花叶围分离了104类菌株，对14个主要菌株进行分子鉴定，14个菌株的ITS序列都被GenBank收录（登陆号为DQ447751-DQ447764）。【结论】叶围细菌的总数量及群落多样性指数在抗虫棉与对应的受体棉之间多数差异不显著。棉花叶围细菌主要涉及9个细菌属，占优势的为芽孢杆菌属（Bacillus）、假单孢菌属（Pseud