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- 2020-06-07 发布于天津
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? 专 题 整 合 ? 植物组织培养所用的培养基营养丰富,加上培养的植物 材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对 无菌操作的要求非常严格。 植物组织培养过程中污染的预防 ? 1 .污染有两种类型 ? (1) 细菌污染。菌斑呈黏液状,界限比较明显,一 般接种后 1 ~ 2 d 即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌。 一般是由接种人员造成的。 ? (2) 真菌污染。菌斑呈绒毛状、絮状,界限不明显, 伴有不同颜色的孢子,接种后 3 ~ 10 d 才能发现。主 要是霉菌污染,可能是植物材料灭菌不当造成的。 ? 2 .组织培养过程各环节的防污染措施 操作过程要求 注意事项 防止外植 体带菌 ①选择好外植体采集时期和采集部位。②在室 内或无菌条件下进行预培养。③外植体严格灭 菌。做灭菌效果试验,多次灭菌和交替灭菌。 保证培养基 及接种器具 彻底灭菌 ①分装时,注射器勿与瓶接触,培养基勿粘瓶 口。②检查封口膜是否有破损。③扎瓶口要位 置适当、松紧适宜。④保证灭菌时间和高压锅 内温度。⑤接种工具使用前彻底灭菌。⑥工作 服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。 操作人员严 格遵守无菌 操作规程 要规范着装,操作过程中不说话等。 保证接种与培 养环境清洁 ①污染瓶经高压灭菌后再清理。②接种环境 定期熏蒸消毒、紫外灯照射或用臭氧灭菌和 消毒。③定期对培养室消毒、防止高温。 ? (1) 微型繁殖 ? 微型繁殖就是用于快速繁殖优良品种的植物组织培养技 术,也叫快速繁殖技术。繁殖过程中的分裂方式是有丝 分裂,亲、子代细胞内 DNA 不变,所以能够保证亲、子 代遗传特性不变。 ? (2) 作物脱毒 ? 作物脱毒是利用茎尖、根尖等无毒组织,进行微型繁殖, 由于微型繁殖操作过程必须在无菌条件下操作,所以所 获幼苗是无毒的。 植物组织培养技术的实践应用 ? (3) 人工种子 ? ①制作方法:人工种子是利用植物组织培养获得胚状体、 不定芽、顶芽和腋芽等,然后包上人工种皮就形成了人 工种子,如图。 ? ②优点:可使在自然条件下不结实或种子昂贵的植物得 以繁殖;保持亲本的优良性状,因该过程为无性繁殖; 节约粮食,减少种子的使用;可以控制添加一些物质, 如除草剂、农药、促进生长的激素、有益菌等。 ? (4) 细胞产物的工厂化生产:用人工培养的愈伤组织提 取细胞中的某种成分,如紫草素、香料等。 菊花组织培养与月季花药培养比较 比较 菊花组织培 养 月季花药培养 相同点 原理 细胞的全能性 环节 培养基配制方法、无菌技术及接种操作 条件 受激素、 pH 、温度、光照等条件影响 不同点 选材 未开花植株的茎上 部新萌生的侧枝 单核期的花药 培养基 MS 培养基 配方要求更严格 流程 制备培养基→外植 体消毒→接种→培 养→移栽→栽培 选材→消毒→接种→培养 →鉴定和筛选→移栽 ? 【典例 1 】 菊花的组织培养和月季的花药培养都是利 用组织培养技术,关于两者的叙述下列说法中正确的 选项有 ( ) 。 序号 比较项目 菊花的组织培养 月季的花药培养 ① 植物激素 不必添加 需要添加 ② 染色体倍性的鉴定 不需要 需要 ③ 光照 每日日光灯照射 12 h 最初不需要,幼小 植株形成后需要 ④ 形成愈伤组织或胚 状体后 不需更换培养基 需要更换培养基 ? A .①②③ B .②③④ ? C .①②④ D .①②③④ ? 解析 菊花的组织培养用茎段来培养,比较容易,不必 添加植物激素;在菊花组织培养中不会发生染色体倍性 的变化;需要每天日光灯照射 12 h ;形成愈伤组织或胚 状体后不必更换培养基。月季花药的离体培养需要添加 细胞分裂素和生长素等植物激素;在花药培养中,通过 愈伤组织形成的植株会出现染色体倍性的变化,所以需 要染色体倍性的鉴定;最初不需要光照,幼小植株形成 后需要光照;形成愈伤组织或胚状体后需要转移到分化 培养基上进一步分化培养。 ? 答案 D ? 植物激素使用的先后顺序以及用量的比例等,对实验结 果的影响不同。 ? (1) 按照不同的顺序使用这两类激素,会得到不同的实 验结果 植物激素对植物组织培养的影响 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞 分裂
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