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①琼脂糖凝胶电泳操作简单,电泳速度快,样 品不需要事先处理;电泳后区带易染色,样品极易洗脱,便 于定量测定。 ②测定蛋白质的相对分子质量常用 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶电泳, 这是因为该方法分离蛋白质完全取决于分子的大小,而非所 带电荷的性质和分子的大小、形状。 【典例 1 】有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是 A. 它们都是分离蛋白质的重要方法 B. 它们的原理相同 C. 使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要 D. 以上说法都正确 【解题关键】 解答本题的关键应明确以下两点: (1) 凝胶色谱法的原理; (2) 电泳法的原理。 【标准解答】 选 A 。凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分 离蛋白质的一种有效方法;电泳法是利用待测样品中各种分 子带电性质的差异和分子本身的大小、形状不同,使带电分 子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离或 鉴定。所以 A 正确, B 错;这两种方法都用到缓冲溶液,以调 节溶液的酸碱度,所以 C 错误。综上所述,答案选 A 。 2. 凝胶色谱操作 (1) 凝胶色谱柱的装填:用蒸馏水溶胀凝胶→均匀装填色谱柱 →在约 50 cm 高的操作压下,用 300 mL 的物质的量浓度为 20 mmol/L 的磷酸缓冲液充分洗涤平衡凝胶 12 h ,使凝胶装填 紧密。 (2) 打开流出口,使缓冲液与凝胶面平齐,关闭出口
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