动物细胞工程经典.pptVIP

5.植物组织培养和动物细胞培养的比较 比较项目 原理 培养基性质 培养基特有成分 培养结果 培养目的 植物组织培养 细胞的全能性 固体培养基 蔗糖、植物激素 植物体 快速繁殖培育无病毒植株等 动物细胞培养 细胞增殖 液体培养基 葡萄糖、动物血清 细胞群体 获得细胞或细胞产物等 相同点： ①无菌无毒条件 ②合成培养基 ③适宜的温度和PH * 考点二：动物体细胞核移植 技术和克隆动物 1、动物核移植的概念： 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体。（克隆动物） 2、动物核移植的类型： 体细胞核移植 （难度高） 受体细胞： 胚胎细胞核移植 MⅡ期的卵母细胞 * 3、动物核移植的过程： 高产奶牛（供体） 从屠宰场收集牛卵 巢，采集卵母细胞，在体外培养到减数第二次分裂中期 MⅡ期卵母细胞 用物理或化学方法（如电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活受体细胞，使其完成减数分裂和发育进程 生出与供体奶牛遗传基础相同的犊牛 将胚胎移入受体（代孕）母牛体内 从供体高产奶牛身体 的某一部位（如耳） 上取体细胞（供体） 去核的卵母细胞 * 核移植 “多莉羊”的诞生 早期胚胎培养 胚胎移植 苏格兰黑面母羊 芬兰白面母羊 去核卵细胞 卵 核 乳腺细胞 早期胚胎 电脉冲融合 核 * 4、体细胞核移植技术的应用前景 （1）改良动物品种 （2）保护濒危动物 （3）克隆动物作为生物反应器，生产医用蛋白 （4）治疗人类疾病，作为异种移植的供体 5、体细胞核移植技术存在的问题： a.成功率非常低 b.绝大多数克隆动物存在健康问题 c.对克隆动物食品的安全性问题也存在争议 * 例：现有A和B两个肉牛品种，A品种牛的细胞组成可表示为A细胞核、A细胞质，B品种牛则为B细胞核、B细胞质。 （1）如果要获得一头克隆牛，使其细胞由A细胞 核和B细胞质组成，基本步骤是，从A品种牛体内 取出体细胞，进行体外培养。然后再从培养细胞 中取出_______注入B品种牛的_____卵母细胞， 经过刺激和培养后，可形成胚胎，该胚胎被 称为_______，将该胚胎移入代孕母牛的______ 中，通过培育可达到目的。 细胞核 去核 重组胚胎 子宫 * （2）一般来说，要想大量获得这种克隆牛比较难，原因之一是卵母细胞的数量______，为解决这一问题，可以用______激素处理B品种母牛。 （3）克隆牛的产生说明 具有全能性。克隆牛的性状主要表现 品种牛的特征。由A、B两品种杂交得到的牛与克隆牛相比，杂交牛细胞核的遗传物质来自______个亲本，细胞质来自______性亲本，克隆牛和杂交牛的遗传物质组成______（相同，不同）。 不足 促性腺 A 两 雌 不同 动物体细胞核 * 考点三：动物细胞融合 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果： 形成杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导融合方法 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 * 5、过程 * 6、意义： （1）突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 （2）成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 （3）特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体。 * 7、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 原理 植物体细胞杂交 动物细胞融合 融合前的处理 用途 诱导融合方法 细胞的全能性 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 (酶解法)使细胞形成单个细胞 去掉细胞壁 分离出原生质体 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振 动、电刺激） 化学（聚乙二醇） 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 * 例1:右图为细胞融合的简略 过程，请据图回答： （1）若A、B是动物细胞，一般 自 ，然后用 ，使其分散开来，A、B到C的过程中，常用的不用于植物细胞的手段是 ，所形成的D称为 。 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官 杂种细胞 胰蛋白酶 灭活的病毒诱导 （2）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠B淋巴细胞，那么，在获得此细胞之前，小鼠已被注射了 。注射后小鼠身体产生了相应的 生成了 。图中的B是 。 骨髓瘤细胞 抗原 免