蛋白质翻译后修饰与加工.ppt

第七章 蛋白质翻译后修饰与加工;蛋白质翻译后修饰, 是指在mRNA被翻译成蛋白质后, 对蛋白质上个别氨基酸残基进行共价修饰的过程. 蛋白质翻译后修饰在生命体中具有十分重要的作用. 人类基因组计划的完成是20世纪最伟大的科技成果之一。在对人类基因组进行仔细研究后发现, 人类基因大约有 30000-50000 个，这仅仅是线虫和果蝇染色体基因数的 3-5倍. 而生命体内复杂生命过程的调控, 仅仅靠这样小数目的基因远不能满足需要。 因此, 蛋白质翻译后修饰过程尤为重要，它使蛋白质的结构更为复杂, 功能更为完善, 调节更为精细, 作用更为专一。 细胞内许多蛋白质的功能,是通过动态的蛋白质翻译后修饰来调控的; 细胞的许多生理功能, 例如细胞对外界环境的应答, 也是通过动态的蛋白质翻译后修饰来实现的。人类生命过程的复杂性不单是基因直接表达的结果, 正是蛋白质翻译后修饰, 使得一个基因并不只对应一个蛋白质, 从而赋予人类生命过程更多的复杂性.;在真核动物细胞中有20多种蛋白质翻译后修饰过程，常见的有泛素化、磷酸化与去磷酸化、糖基化与去糖基化、脂基化、甲基化和乙酰化等。;近年来, 随着人类基因组和蛋 白质组学工作的开展, 关于蛋白质翻译后修饰的研究也取得一系列进展. 磷酸化涉及细胞信号转导、神经活动、肌肉收缩以及细胞的增殖、发育和分化等生理病理过程; 糖基化在许多生物过程中如免疫保护、病毒的复制、细胞生长、炎症的产生等起着重要的作用; 脂基化对于生物体内的信号转导过程起着非常关键的作用; 组蛋白上的甲基化和乙酰化与转录调节有关。 在体内，各种翻译后修饰过程不是孤立存在的。 ;原核生物中肽链起始合成时，N端为甲酰甲硫氨酸，真核肽链合成时N端是甲硫氨酸，但是成熟的蛋白质中N端并无甲酰甲硫氨酸，大多数蛋自质的N端也不是甲硫氨酸。 在生物合成过程中新生的肽链N端由去甲酞基酶去除甲酰甲硫氨酸残基的甲酰基，氨肽酶去除N端甲硫氨酸或N端某些氨基酸残基。一些分泌性蛋白质、激素及酶最初合成的是不具有生物活性的前体，如白蛋白原、胰岛素原等。 蛋白质前体要经过蛋白酶切割，去除一部分肽段后才具有活性。它可以分为两种类型：①蛋白质前体在细胞内被加工成有生物活性的蛋白质，然后分泌到胞外；②蛋白质前体被分泌到胞外或消化道，被蛋白酶加工成有生物活性的蛋白质，如前胶原分子活化为胶原分子，胰蛋白酶原激活等。;第一节 蛋白质的糖基化 ;1，糖肽连接键的类型 ;O-糖肽键连接;Roles of oligosaccharides in recognition and adhesion at the cell surface; (2)凝集素的特异结合作用 ;.;细胞间的粘附是细胞间相互作用起决定性作用的起始步骤。作为致病的微生物，首先对宿主细胞进行粘着，然后才能感染和致病。 细胞表面的凝集素能专一地识别并结合另一细胞的糖链。凝集素的这种特性，在细胞与细胞，细胞与基质的粘附中起一定作用。 ;1990年11月，三个小组同时发现了血管内皮细胞－白细胞黏附分子1（ELAM－1），后改称E选择素（E-selectin），又称为动物凝集素，能识别白细胞表面的SLex(一种血型抗原)四聚糖。 当组织受损或感染时，白细胞黏附于内皮细胞，沿血管壁滚动并穿过管壁进入受损组织，杀灭入侵病原物，但过多的白细胞聚集，则会引起炎症及类风湿等自身免疫疾病。 ;.;美籍华裔科学家王启辉首先用酶法合成了SLex，并已由Cytel公司生产。Glycomed公司则从中药甘草中，找到了SLex的类似物甘草素，可用于封闭血管内皮细胞表面的E选择蛋白，从而达到抗炎的目的。 ;.;Slex及其模拟物的结构;（3）构成某些抗原的决定子 ;;三、糖蛋白的生物合成 ;1，N-糖链的合成 ;1）寡糖链前体的合成 ;2）寡糖链前体的转移 ;3）寡糖链前体的后加工 ;4）N-糖链的成熟 ;3，O-糖链的生物合成 ;狗颌下唾液腺O-连接糖链的合成途径 ;四、蛋白糖基化和去糖基化的化学调控 ;糖蛋白的去糖基化酶 ;内切型糖苷酶有如下几类：这些酶由于都是从糖链内部专一性切开某个键，因此在糖链结构分析以及结构与功能关系研究中非常有用，也是目前糖基化工程中的重要酶,，可应用于生物学的多个领域。 例如：近年来内切型β-半乳糖苷酶结合单克隆抗体，免疫化学方法检测红细胞表面带有血型Ii-抗原的乳糖胺聚糖以及由聚乳糖胺修饰末端的各种抗原包括ABH和SSEA-1(Lex)，建立了正常人红细胞聚乳糖胺轮廓，并分析了遗传性贫血病人的不正常糖基化轮廓。发现这类病人的红细胞含增高的聚乳糖胺神经酰胺。和乳糖系列的糖脂,而其中有两条糖蛋白带很少被聚乳糖胺糖基化。这是一种糖基化缺陷病，现已对该病进行了广泛的分子生物学研究。;糖胺酶(Glycoamidase,