第四章外植体的选择、消毒和接种全版.pptVIP

接种操作: * 横插法与竖插法: * 接种时有一个敞口的过程，是极易引起污染的时期，主要由空气中的细菌和工作人员本身引起，因此，接种室要严格进行空间消毒。接种室内保持定期用1％~3％的高锰酸钾溶液对设备、墙壁、地板等进行擦洗。除了使用前用紫外线和甲醛灭菌外，还可在使用期间用70％的酒精或3％的来苏儿喷雾，使空气中灰尘颗粒沉降下来。 接种室要严格消毒 * (1)在接种4h前用甲醛熏蒸接种室，并打开其内紫外灯进行灭菌； (2)在接种前20min，打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯； (3)接种员先洗净双手，在缓冲间换好专用实验服，并换穿托鞋等； (4)上工作台后，用酒精棉球擦拭双手，特别是指甲处。然后擦拭工作台面； 无菌操作可按以下步骤进行： * (5)先用酒精棉球擦拭接种工具，再将镊子和剪子从头至尾过火一遍，然后反复过火尖端处，对培养皿要过火烤干； (6)接种时，接种员双手不能离开工作台，不能说话、走动和咳嗽等； (7)接种完毕后要清理干净工作台，可用紫外灯灭菌30min。若连续接种，每5天要大强度灭菌一次。 * 接种前外植体消毒顺序: * 第三节 培养条件 在植物组织培养中温度、光照、湿度等各种环境条件，培养基组成、ＰＨ值、渗