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2019/9/21 第四章 高效液相色谱法和 超临界流体色谱法 4.2.1 高效液相色 谱 仪与结构流程 4.2.2 主要部件 4.2.3 检测器 第二节 高效液相色谱仪 instrument of HPLC High performance liquid chromatography and Supercritical fluid chromatography 2019/9/21 4.2.1 液相色谱仪与结构流程 2019/9/21 液相色谱仪( 2 ) 2019/9/21 液相色谱仪( 3 ) 2019/9/21 液相色谱仪( 4 ) 2019/9/21 液相色谱仪( 5 ) 2019/9/21 液相色谱仪( 6 ) 2019/9/21 1. 结构流程 2019/9/21 2019/9/21 4.2.2 主要部件 (1) 高压输液泵 ? 主要部件之一,压力: 150 × 10 5 ~ 350 × 10 5 Pa 。 ? 为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相 (10 μm) ,液 体的流动相高速通过时,将产生很高的压力,因此高压、 高速是高效液相色谱的特点之一。 ? 应具有压力平稳,脉冲小,流量稳定可调,耐腐蚀等特 性。 (动画) 2019/9/21 (2) 梯度淋洗装置 外梯度(高压梯度) : 利用两台高压输液泵,将 两种不同极性的溶剂按一定的 比例送入梯度混合室,混合后 进入色谱柱。 内梯度(低压梯度) : 一台高压泵 , 通过比例调 节阀 , 将两种或多种不同极性 的溶剂按一定的比例抽入高 压泵中混合。 2019/9/21 (3) 进样装置 流路中为高压力工作状 态,通常使用耐高压的六通 阀进样装置, 结构如图所示: 2019/9/21 (4) 高效分离柱 柱体为直形不锈钢管,内径 1 ~ 6 mm ,柱长 5 ~ 40 cm 。 发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。 2019/9/21 (5) 检测器 紫外检测器 示差折光检测器 荧光检测器 光电二极管阵列检测器 2019/9/21 4.2.3 检测器 a. 紫外检测器 应用最广,对大部分有机 化合物有响应。 特点: 灵敏度高; 线性范围宽; 流通池可做得很小 (1mm × 10mm ,容积 8 μL) ; 对流动相的流速和温度变化不敏感; 波长可选,易于操作; 可用于梯度洗脱。 2019/9/21 b. 光电二极管阵列检测器 紫外检测器的重要进展; 光电二极管阵列检测器: 1024 个二极管阵列,各检测 特定波长,计算机快速处理,三维立体谱图。 2019/9/21 2019/9/21 光电二极管阵列检测器 2019/9/21 三维:光谱 - 色谱图
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