实验六 植物细胞骨架光学显微镜观察.pptVIP

实验六植物细胞骨架的光学 显微镜观察 实验目的 1通过对洋葱内皮细胞的处理,掌握植物 细胞骨架的制备方法与显微形态观察 2掌握考马斯亮蓝R250对植物细胞骨架 染色的方法。  实验原理 细胞骨架是由蛋白质丝组成的复杂网状 结构,成分有微丝、微管和中间纤维。 TritonⅩ-100可溶解抽提细胞中的蛋白质 和脂质,但不破坏细胞骨架系统。 戊二醛固定、考马斯亮蓝R250染色,光 学显微镜观察网状结构的由微丝组成的 细胞骨架。  三实验仪器、材料和试剂 ■1仪器、用具:普通光学显微镜等 2材料:洋葱鳞茎 3试剂 (1)M-缓冲液 (2)6mmo磷酸缓冲液 (3)1% TritonⅩ-100 (4)0.2%考马斯亮蓝R250  三实验仪器、材料和试剂 3试剂 (5)3%戊二醛 (6)50%、70%、95%乙醇 (7)叔丁醇、正丁醇、二甲苯、中性树胶  四实验方法(I) 1洋葱鳞茎内表皮(1cm大小) 50m烧杯(磷酸缓冲液)→下沉 2吸去缓冲液→加1% Triton-100 20~30分钟 3吸去 Triton x-100→M-缓冲液洗 3次/10分钟 43%戊二醛固定0.5-1小时