实验六过氧化氢酶米氏常数.pptVIP

实验七过氧化氢酶米氏常 数(Km)的测定  、实验目的 学习米氏常数(Km)的测定方法。  实验原理 26,16fD下列反应 H2O2浓度可用KMno4在硫酸存在下滴 定测知。 2KMnO 4+5H202t3HSo4gH2o 2Mnso4+K2So4+5021↑+8 求出反应前后H2O2的浓度差即为反应速 度。双倒数作图法求出过氧化氢酶的米 氏常数。  米氏常数的测定:双倒数作图法( Lineweaver Rurk法) Km 1 1 Vmax [s Vmax Intercept --1/Koa ntercept = 1/V  试剂 005mo/L草酸钠标准液将草酸钠(AR) 于100~105℃烘12h。冷却后,准确称取 0.67g,用水溶解倒入100m量瓶中,加入浓 H2s045m,加蒸馏水至刻度,充分混匀 此液可贮存数周 ■2.约0.02 mI KMno4储存液称取 KMno43.4g,溶于1000ml蒸馏水中,加热 搅拌,待全部溶解后,用表面皿盖住,在低于 沸点温度上加热数小时,冷后放置过夜,玻璃 丝过滤,棕色瓶内保存