淀粉酶制备及活力测定.pptVIP

x项目二淀粉酶的制备及活力测定 姓名:张婉月 班级:生物制药1311 学号:2013040829 组别:第2组 指 彭开  目录 背景知识 实训原理 实验材料及仪器 实训步骤 注意事项 参考文献  背景知识 淀粉是植物最主要的贮藏多糖,也是人和动物的重要食物 和发酵工业的基本原料。淀粉经淀粉酶作用后生成葡萄糖、 麦芽糖等小分子物质而被机体利用 淀粉酶属于水解酶类,是催化淀粉、糖原、糊精中糖苷键 水解的一类酶的统称。此类酶广泛存在于动植物和微生物 中。根据对淀粉的作用方式不同,可将淀粉酶分为α淀粉 酶、β淀粉酶、葡萄糖淀粉酶、脱支。  s酶的活力是酶的重要参数,反映的是酶的催化能力, 因此测定酶活力是研究酶的基础。 淀粉酶随机作用于直链淀粉和支链淀粉的直链部 分α-1,4糖苷键,单独使用时最终生成寡聚葡萄糖、 α极限糊精和少量葡萄糖。Ca2-能使α-淀粉酶活 化和稳定,它比较耐热但不耐酸,pH3.6以下可使 其钝化。 sβ淀粉酶从非还原端作用于α-1,4糖苷键,遇到支 链淀粉的a-1,6键时停止。单独作用时产物为麦芽 提积6极限糊精。B淀粉酶是一种巯基酶,不需要 C1—等辅助因子,最适p酸,与α-淀 反,它不耐热但觉耐酸,60℃保温15min可使  α-淀粉酶活力测定常用的方法 测定方法 优点 缺点 DNS 灵敏、准确、精确度高,测定步骤较繁,不便分 适宜精确测量小样品析大量样品,测定范围 α-淀粉酶活性大小 较窄 凝胶扩散法 简便、快速、省时、省边界不清晰,灵敏度与 力,消耗材料和药品较准确度较低不适宣精 少,不需要特殊仪器,测确测量a淀粉酶活性 定范围较宽 的大小 降落值法 快速、省时、重现性好、消耗的材料多,间接测 行性好、消耗的药品定a-淀粉酶活性大小 少,适宜于测量大量样 品