第14章色谱技术知识讲解.pptVIP

1.色谱技术概述;1.3色谱的分类;根据固定相的形状不同的分类： ;2.色谱分离的基本原理;2.1色谱分离的基本原理;（2）阻滞因子Rf 定义：阻滞因子是在色谱系统中溶质的移动速度和标准物（与固定相没有亲和力的流动相 Kd=0）的迁移率之比 意义：在于体现某一种溶质与固定相之间的亲和力大小;2.2色谱图及基本概念;洗脱曲线;（5）洗脱体积 色谱柱中，使溶质从柱中流出所需流动相体积，为洗脱体积 不同的溶质，由于和固定相的亲和力的不同，洗脱体积也有所差异;（6）保留值; (7)分离度：相邻两色谱峰保留值之差与两组色谱峰峰底宽度平均值之比。;（8）色谱柱的理论塔板：流动相与固定相平均浓度达传质平衡时的一段柱高（塔板高度） 反应不同时刻溶质在色谱柱中的分布以及分离度与柱高之间的关系 理论塔板数的计算方法： N---理论塔板数 tR---保留时间 W1/2---半峰宽 Wb---峰底宽度 理论塔板高度：H L---柱长;3.色谱系统的基本组成; Pharmacia ? KTA 层析系统 ;调糊 预装一定量的溶剂或缓冲液 连续加入悬胶液 打开出口阀：层析剂沉降 排除空气 检查均匀度;;;;（5）清洗与再生;离子交换色谱 凝胶过滤 吸附色谱 亲和色谱 分配色谱 疏水作用层析;（1）离子交换色谱;常用的离子交换剂;离子交换柱层析操作;怛