凝胶渗透色谱讲课教案.pptVIP

凝胶渗透色谱法 ; 体积排阻色谱法定义及分类 体积排阻色谱法(SEC)：利用多孔凝胶固定相的独特特性而产生的一种主要依据分子尺寸大小进行分离的方法。 ; ;二、基本原理; ; ;MW与V之间的关系; ●排阻极限 排阻极限是指不能进入凝胶颗粒孔穴内部的最小分子的分子量。所有大于排阻极限的分子都不能进入凝胶颗粒内部，直接从凝胶颗粒外流出，所以它们同时被最先洗脱出来。排阻极限代表一种凝胶能有效分离的最大分子量，大于这种凝胶的排阻极限的分子用这种凝胶不能得到分离。随固定相不同，排阻极限范围约在400至60×106之间。 ●渗透极限 能够完全进入凝胶颗粒孔穴内部的最大分子的分子量。在选择固定相时，应使欲分离样品粒子的相对分子质量落在固定相的渗透极限和排阻极限之间。;Hi： 峰高 Mi：分子量 ;需要GPC软件才可计算Mw;Waters 1515型凝胶渗透色谱仪; 泵系统： 包括一个溶剂储存器、一套脱气装置和一个高压泵。它的工作是使流动相（溶剂）以恒定的流速流入色谱柱。泵的工作状况好坏直接影响着最终数据的准确性。越是精密的仪器，要求泵的工作状态越稳定。要求流量的误差应该低于0.01mL/min。;色谱柱：; GPC 仪器对载体的要求： 1. 良好的化学稳定性和热稳定性； 2. 有一定的