蛋白质的四级结构 精选文档.pptVIP

二、 蛋白质的分离纯化 ( 一 ) 盐析和有机溶剂沉淀 ( 二 ) 电泳 ( 三 ) 透析和超滤 ( 四 ) 层析 ( 五 ) 超速离心 分类： 根据支持物的不同，电泳电泳可分为： 薄膜电泳、凝胶电泳 …… （二）电 泳 概念： 带电颗粒在电场中向着所带电荷相反 方向移动称为电泳。 原理 : 不同的蛋白质的因结构、形状和带电 量的不同而有不同的泳动速度，从而 达到分析和分离蛋白质的目的 应用： 电泳技术是生化常用分析技术之一 利用压力或离心力强行使水和小分子杂质 通过超滤膜 ( 一种半透膜 ) 除去，而蛋白质 留在膜上，称为 超过滤 将蛋白质溶液放在半透膜的袋内，置于 流动的适当的缓冲液（如纯水）中，小 分子杂质（如硫酸铵、氧化钠等）从袋 中透出，而蛋白质保留于袋中从而将蛋 白质纯化，这种方法称为 透析 （三）透析 透析工作图 半透膜原理 ? 层析种类： – 凝胶过（分子筛） – 离子交换层析（阴离子和阳离子） – 亲和层析 ( 四 ) 层析 带正电荷多蛋 白紧密结合 带负电荷多蛋 白流过层析柱 阳 离 子 交 换 树 脂 工 作 示 意 图 分子筛层析 四 蛋白质的四级结构 (quaternary structure) 是指亚基间的空间排布、亚基间相互 作用与接触部位的布局，不包括亚基本 身的空间结构。 亚基间以次级键相连， 绝无共价键 1. 概念 蛋白质分子由两条或两条以上肽链组 成，每条肽链各自形成了独立的三级 结构 ， 分子中的每一个具有独立三级 结构肽链 , 称为亚基 亚基 (subunit) 2. 维持蛋白质四级结构的作用力 主要是疏水作用 次级键 盐键、氢键 第三节 蛋白质结构与功能的关系 （一） 一级结构是空间构象的基础 一、蛋白质一级结构与功能的关系 以 124 个氨基酸残基组成的牛胰核糖 核酸酶（ 4 对二硫键）为例说明 牛胰核糖核酸酶的变性与复性 β - 巯基乙醇 尿素或盐酸胍 透析 有活性 无活性 1. 一级结构相似的蛋白质功能相似 一级结构不同的蛋白质功能不同 胰岛素的一级结构及种属差异 （二）一级结构与功能的关系 ACTH 促肾上腺素皮质激素 MSH 促黑激素 一级结构不同的蛋白质功能不同 HbS 与 HbA 的区别 Β - 亚基第 6 位氨基酸 正常人： Glu 患者： Val 由 4 个亚基组成 血红蛋白 功能 : 运输 O 2 二、蛋白质空间结构与功能的关系 （一）肌红蛋白 Mb 与血红蛋白 Hb 蛋白质的空间结构决定生物学功能 肌红蛋白（ 1 个亚基）与血红蛋白（ 4 个亚基） 且一级结构有较大差异，但均具有与氧可逆地 结合的能力 其结构特点是，都与血红素（辅基）共价结合 O 2 O 2 （二）血红蛋白构象变化与结合氧的能力 变构效应 蛋白质分子与它的配体结合后构象发生变化 , 其功能也随之变化的现象 , 称为 变构效应 协同效应 蛋白质分子中的 1 个亚基与其的配体结合后 , 能影响其它亚基与配体的结合 , 称为 协同效应 促进 正协同效应 抑制 负协同效应 血红蛋白与氧结合的正协同效应 氧 饱 和 度 静脉血 动脉血 氧分压 P 50 100% - Hb M b 第四节 蛋白质的理化性质 一 、蛋白质的理化性质 （一）两性解离和等电点 蛋白质是两性电解质。在溶液中的带电状况 主要取决于溶液的 pH 值 Pr COOH NH 3 + Pr COO - NH 3 + Pr COO - NH 2 +OH - +H + +OH - +H + pH=pI pHpI pHpI 此时溶液的 pH 值称为蛋白质的等电点 (pI) 等电点（ pI ）： 在某一 pH 值溶液中， 蛋白质酸性基团和碱性基团的解离程度相当 蛋白质分子所带正负电荷相等，净电荷为零 蛋白质分子颗粒大小 1-100nm 之间 , 属胶体颗粒范 围， 在溶液中能形成稳定的胶体 蛋白质的胶体原因： ? 表面形成水化层 ? 表面同种电荷的斥力 （二）蛋白质的胶体性质 蛋白质的聚沉 （三）蛋白质的变性、沉淀与凝固