PCR实验室检查要点()PDF打印版.pdfVIP

学 海 无 涯 聚合酶链反应（PCR）检验实验室 检查要点指南（XXXX 版） 聚合酶链反应检验实验室是指通过基因扩增的方式检测特定的 DNA 或 RNA 的检验实验室。聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction ，PCR）是一种在体外特异性扩增靶 DNA 序列的技术， 其基本过程为模板双链 DNA 的变性、引物与模板 DNA 的退火和在 DNA 聚合酶引导下的链延伸反应三个阶段的多次循环。每一次循环 后的扩增产物均可作为下一轮循环的模板，理论上，扩增产物量呈指 n 数形式上升，即经过 n 个循环后，产物量增加到 2 倍。PCR 试剂操 作简单，短时间内在体外可获得数百万个特异靶 DNA 序列的复制， 为临床疾病的诊断、治疗监测和预后评估提供了一种极有帮助的实验 室辅助手段。 PCR 检验实验室是 PCR 试剂生产企业在产品检验过程中不可缺 少的工作环境，其环境控制水平和质量管理水平直接影响着最终产品 是否合格，能否放行。由于该产品本身的特殊性，《医疗器械生产质 量管理规范附录体外诊断试剂》、《医疗器械生产质量管理规范体外诊 断试剂现场检查指导原则》条款中，明确对 PCR 试剂的生产和检验 环境做出规定。此外现行卫生行业的法规、标准以及相关文献中对于 PCR 检验实验室均作出规定，主要涉及 《全国临床检验规程》（第三 版）、《医疗机构临床基因扩增管理办法》（卫办医政发〔XXXX〕194 号）、《医疗机构临床基因扩增检验实验室工作导则》及 《临床诊断中 聚合酶链反应（PCR）技术的应用》（WS/T 230-XXXX）等行业标准 1 学 海 无 涯 的相关要求。 本检查指南旨在帮助北京市医疗器械监管人员增强对 PCR 检验 相关过程的认知和把握，指导全市医疗器械监管人员对 PCR 检验实 验室设计建设与质量控制的监督检查工作。同时，为 PCR 试剂生产 企业在 PCR 检验实验室的设计建造和管理要求提供参考。 当国家相关法规、标准、检查要求发生变化时，应当重新讨论以 确保本检查指南持续符合要求。 一、适用范围 本检查指南可作为北京市食品药品监督管理局组织、实施的体外 诊断试剂产品注册质量管理体系现场核查、《医疗器械生产许可证》 现场核查、医疗器械生产监督检查等各项涉及 PCR 检验实验室检查 的参考资料。 基因测序检验实验室等涉及 PCR 试剂的相关部分应当参照本检 查指南执行。 二、检查要点 （一）现场查看生产企业 PCR 检验实验室布局 生产企业应当提供 PCR 检验实验室设计方案和/或平面设计图 （应当标明风向或压差梯度）。 1.PCR 检验实验室与 PCR 试剂生产区域应当在各自独立的建筑 物或空间内，保证空气不直接联通，防止扩增时形成的气溶胶造成交 叉污染。 2 学 海 无 涯 2.原则上 PCR 检验实验室应当设置以下区域：试剂储存和准备 区、标本制备区、扩增区、扩增产物分析区。根据使用仪器的功能， 区域可适当合并。若使用实时荧光定量 PCR 仪且不需要进行后续产 物分析工作，扩增区、扩增产物分析区可合并。若使用样本处理、核 酸提取及扩增检测为一体的自动化分析仪，则标本制备区、扩增区、 扩增产物分析区可合并。 3.各区域在物理空间上应当完全相互独立，各区域无论是在空间 上还是在使用中，应当始终处于完全的分隔状态。不应当只是形式上 的分区，不应当是一个区域嵌套一个区域。 4.各区域不应当有空气的直接相通。扩增区与扩增产物分析区各 区域宜采用独立直排方式出风。采用空调机组方式的，PCR 检验实 验室应当具备独立空调机组；同时应当考虑停机后各房间空气连通的 可能性，采取必要的控制措施。 5.按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分 析区方向空气压力应当以递减的方式进行，