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- 2020-07-24 发布于福建
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药物对离体豚鼠回肠的作用
(浙江大学2011级临床医学(八年制)专业B班09组,毛昳涵)
【摘要】目的:观察胆碱能神经递质乙酰胆碱、炎症介质组胺对离体豚鼠回肠平滑肌的作用;以及M胆碱受体拮抗剂阿托品和H1受体拮抗剂氯苯那敏对乙酰胆碱、组胺的拮抗作用。方法:制备豚鼠回肠标本1-1.5cm,固定于有37℃台氏液(定量)的麦氏浴槽中,通过张力换能器与RM6240多道信号采集处理系统记录不同药物处理下回肠标本收缩幅度曲线,重复10组。结果:乙酰胆碱可使回肠平滑肌收缩加强,而阿托品处理后乙酰胆碱的平滑肌收缩效用减弱(p0.001),组胺可使回肠平滑肌收缩加强,氯苯那敏处理后组胺的平滑肌收缩效用减弱(p0.001)。结论:乙酰胆碱、组胺可使回肠平滑肌收缩加强,而阿托品、氯苯那敏可分别阻断它们与受体的结合,起拮抗作用。
1 材料 [1]
豚鼠;麦氏浴槽,超级恒温器,张力换能器,RM6240多道生理信号采集处理系统;台氏溶液,acetylcholine,chloride,atropine sulfate,histamine phosphate,chlorpheniramine,BaCl2。
2 方法 [1]
2.1 实验装置准备和仪器参数设置 换能器输出线接RM6240多道生物信号采集处理系统,点击“实验”菜单中的“肠肌记录”,仪器参数:通道时间常数为直流,滤波频率为101Hz,灵敏度3g,采样频率200Hz,扫描速度1s/div。麦氏浴槽中加固定量(10-15ml)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37±0.5℃。通气管接95%O2+5%CO2混合气体管道。用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
2.2 标本制备
2.2.1 取豚鼠一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹腔,找到回盲部,在离回盲部1cm处剪断,取出回肠15cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将内容物冲洗干净,然后将回肠剪成数小段(约1-1.5cm),换以新鲜台氏液备用,注意操作时勿牵拉肠段以免影响其收缩功能。
2.2.2 取小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线,并打结。注意保持肠管通畅,勿使其封闭。肠管一段连线系于浴槽固定钩上,然后放入37℃麦氏浴槽中。再将肠管的一端连线系在张力换能器的悬臂梁上,调节肌张力至1g。
2.3 实验观察
2.3.1 待离体回肠稳定10min后,记录一段正常张力曲线。
2.3.2 向麦氏浴槽中加10-2g/L ACh 0.3ml,观察并记录其收缩曲线,达峰时加入拮抗剂阿托品0.3ml,曲线稳定后加ACh,记录一段曲线后,用台氏液连续冲洗浴槽3次换液,稳定5min。
2.3.3 加10-2g/L histamine 0.3ml,观察并记录其收缩曲线,待曲线稳定后,加入拮抗剂10-3g/L氯苯那敏0.3ml,观察5min,加同量histamine,观察并记录其收缩曲线。换液,稳定5min。
2.4 数据记录 记录在Ach、阿托品+Ach、His、扑尔敏+His的作用下,离体豚鼠回肠平滑肌的收缩强度共4组数据。比较阿托品加入前后和扑尔敏加入前后两种情况下平滑肌收缩强度的变化。
2.5 统计方法 结果以?x? s表示,对实验数据分析采用Student t test进行组间显著性检验。
3 结果
3.1 药物对离体豚鼠回肠作用生物信号波形
图1 实验全程生物信号波形
3.2 数据记录
10组离体豚鼠回肠实验的原始数据见附录1,统计结果见表1。
表1 药物对离体豚鼠回肠平滑肌张力的影响
组别
样本量n
收缩幅度(g)
乙酰胆碱
10
0.934±0.418
阿托品+乙酰胆碱
10
0.099±0.086 ***
组胺
10
0.814±0.415
氯苯那敏+组胺
10
0.101±0.064 ###
注:***:p0.001,与乙酰胆碱组比较;###:p0.001,与组胺组比较。
乙酰胆碱浸润可使回肠平滑肌收缩,收缩幅度0.934±0.418 g;M受体拮抗剂阿托品处理后,再加同量乙酰胆碱,回肠平滑肌收缩幅度显著减小(0.099±0.086 g vs 0.934±0.418 g,p0.001),验证了阿托品可阻断M受体,拮抗乙酰胆碱对回肠平滑肌作用。
组胺浸润可使回肠平滑肌收缩,收缩幅度0.814±0.415 g;H1受体拮抗剂氯苯那敏处理后,加同量组胺,回肠平滑肌收缩幅度显著减小(0.101±0.064 g vs 0.814±0.415 g,p0.001)。验证了氯苯那敏可阻断H1受体,拮抗组胺对回肠平滑肌的收缩作用。
4 讨论
4.1 乙酰胆碱与阿托品对回肠平滑肌的药
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