2019年第9章氨基酸发酵.pptVIP

②培养基中苏氨酸、蛋氨酸的控制： 赖氨 酸生产菌都是高丝氨酸缺陷型，苏氨酸和 蛋氨酸是赖氨酸生产菌的生长因子，在发 酵过程中，如果培养基中两者含量丰富， 就会只长菌，而不产或少产赖氨酸，所以 在发酵时，将苏氨酸和蛋氨酸控制在亚适 量，以提高赖氨酸产量。 ③发酵中生物素控制： 赖氨酸生产菌多由 谷氨酸生产菌诱变而来，都是生物素缺陷 型，培养基中限量添加生物素，会导致发 酵转向谷氨酸方向，大量积累谷氨酸。 如 果培养基中添加过量生物素，会使细胞内 合成的谷氨酸对谷氨酸脱氢酶发生抑制作 用，则抑制谷氨酸合成，从而转向天冬氨 酸，大量积累赖氨酸。 ④发酵时物质的添加 某些物质对赖氨酸产量的影响 3 ．赖氨酸的提取 其下游加工包括 发酵液预处理、提取、精制 三个阶段。 （ 1 ）发酵液顶处理 发酵液中加入絮凝剂 ( 明矾等 ) 絮凝后过滤除 菌体，也可高速离心进行固 - 液分离，回收菌 体进一步加工利用，滤液用盐酸调节 pH 4.0 后备用。 （ 2 ）赖氨酸提取方法： 有 沉淀法、有机溶 剂抽提法、离子交换、电渗析 四种方法。 工 业上多采用 离子（强酸性）交换法 来提取。 赖氨酸是碱性氨基酸，等电点为 9.59 。 在 pH 2.0 左右被强酸性阳离子交换树脂所吸 附；在 pH 7.0~9.0 时被弱酸性阳离子交换树 脂所吸附。 强酸性阳离子交换树脂的氢型对赖氨酸的吸 附比铵型容易得多，但是铵型能选择性地吸 附赖氨酸和其他碱性氨基酸，不吸附中性和 酸性氨基酸，同时在用氨水洗脱赖氨酸后树 脂不必再生。 所以多选铵型强酸性阳离子交换树脂。 ①树脂的处理过程： 732# 阳离 子树脂 水洗 1mol/L 的 NaOH 处理 水洗至 pH6.0 水洗至 pH8.0 1Mol/L 的 HCl 处理 1Mol/L 的 氨水处理 水洗至 pH8.0 铵型树 脂（待用） ②离子交换操作方式： 用动态法离子交换 柱交换操作方式，采用多柱串联。 ③水洗： 用水洗柱至呈中性，以除去可溶 性和非可溶性杂质，以提高赖氨酸质量。 ④氨水洗脱： 后面的洗脱液含赖氨酸少而 含氨量高，并于洗脱用氨水中，以提高收 集率。 ⑤浓缩结晶： 真空浓缩除氨，用盐酸调 pH 4.9 ，再减压浓缩， 5 ℃静置结晶 2 天，得赖 氨酸盐酸盐晶体粗品。 第 9 章 氨基酸发酵 氨基酸制备最早是在 1820 年用蛋白质酸水 解开始的， 1850 年化学合成氨基酸研究成 功， 1956 年发酵生产谷氨酸。 氨基酸是重要营养物质，具有重要的生理 功能，近年来随着氨基酸工业的发展，氨 基酸在食品、医药、农业、化妆品等领域 得到广泛应用，因此氨基酸的生产具有重 要的意义。 食品工业中， 甘氨酸、丙氨酸具有甜味， 天冬氨酸、谷氨酸具有酸味，谷氨酸钠、 天冬氨酸钠具有鲜味，赖氨酸、蛋氨酸等 是人体必需氨基酸。 医药工业中， 多种复合氨基酸制剂可通过 输液治疗营养或代谢失调；精氨酸药物用 于治疗由氨中毒造成的肝昏迷；丝氨酸药 物用作疲劳恢复剂；蛋氨酸、胱氨酸用于 治疗脂肪肝； L- 谷氨酸与 L- 谷氨酰胺用于治 疗脑出血后的记忆力障碍等。 化妆品生产中， 胱氨酸用于护发素，丝氨 酸用于面霜中；谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸 与脂肪酸形成的表面活性剂，具有清洗、 抗菌等功能，用于护肤品、洗发剂中。 在农业中， 苯丙氨酸和丙氨酸可用于治疗 苹果疮痂病；甘氨酸可制成除草剂。赖氨 酸、蛋氨酸添加在饲料中，能加速家畜、 家禽的生长，改善肉的质量。 从 20 世纪初期，氨基酸实现工业化生产以 来，氨基酸生产大体有 蛋内质水解法 、 化学 合成法 、 微生物发酵法 和 酶法 四种生产方法。 蛋白质水解法： 早期味精生产、复合氨基酸； 化学合成法： DL- 蛋氨酸、甘氨酸、 DL- 丙 氨酸； 酶法： L- 丙氨酸、 L- 色氨酸、 L- 丝氨酸； 微生物发解法 ： 生产 60% 以上的氨基酸，包 括直接发酵法和添加前体发酵法。 前三种方法成本高，工艺复杂，难以达到工 业化生产目的。 9.1 谷氨酸的发酵生产 谷氨酸发酵规模、产量最大。 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治 疗神经衰弱以及配制营养注射剂等。 我国是世界最大味精生产大国。 谷氨酸发酵工艺流程 1 ．谷氨酸生产原料 包括碳源、氮源、无机盐和生长因子等。 发酵原料选择要考虑： 菌体生长繁殖的营 养需求、有利于谷氨酸大量积累、产品提 取容易、生产周期短及价格便宜。 （ 1 ）碳源： 是构成菌体和合成谷氨酸的