2019年生物制药五.ppt

（四）、溶解氧影响与控制 溶解氧（ dissolved oxygen, DO ）是指溶解于培养 液中的氧。 溶解氧浓度由 供氧 和 需氧 两方面所决定，供氧 (oxygen supply) 是指氧溶解于培养液的过程。菌体吸 收溶解氧的过程是耗氧（需氧）过程。不同菌种对溶解 氧量的需求是不同的，有一个适宜的范围，必须通过试 验确定临界氧浓度和最适氧浓度，并在发酵中维持最适 氧浓度。 临界氧浓度： 不影响呼吸或产物合成的最低溶解氧浓度。 溶解氧控制 直接提高溶解氧：增加氧传递推动力和通气速率等。 间接控制溶解氧：控制菌体浓度。 工艺控制方法：控制补料速度，调节温度（降低）， 培养基（配方，液化，降低粘度），中间补水，添加 表面活性剂（消沫剂种类及数量次数时间）。 （五）、 CO 2 的影响及其控制 1 、 CO 2 对发酵的影响 CO 2 对微生物生长或发酵具有刺激或抑制作用， 还影响培养基的酸－碱平衡。 CO 2 对细胞的影响机理： ① 直接影响细胞膜的结构，从而影响细胞的形 态和生理过程。 ② 与其他物质发生化学反应，或与生长必需的金 属离子形成碳酸盐沉淀，间接影响菌体的生长和发酵 产物的合成。 2 、 CO 2 浓度的控制 通气和搅拌是控制 CO 2 浓度的一种方法。 降低通气量和搅拌速率，有利于增加 CO 2 在 发酵液中的浓度，反之，就会减小 CO 2 浓度。 另外， CO 2 的产生与补料工艺控制密切相关， 如：青霉素发酵时，补糖会增加排气中 CO 2 浓度和 降低培养液的 pH 。 （六）、 补料的作用和控制 1 、 补料和放料 补料（ fill ）： 间歇或连续的补加一种或多种成 分的新鲜培养基就是补料。 放料（ wihtdraw ）： 发酵到一定时间，产生了代 谢产物，放出一部分发酵液（进行提取），又称带放。 补料、放料的作用在于： 补充营养物质 ； 改善发酵液流 变学性质 ； 调控培养液的 pH ； 解除基质过浓的抑制、产物 的反馈抑制和葡萄糖分解阻遏效应 ； 避免在分批发酵中 因一次性投糖过多造成细胞大量生长、耗氧过多而供氧 不足的状况。 2 、 补料控制系统 （ 1 ）、反馈控制系统 由传感器、控制器、驱动器组成。依据溶氧、 pH 、呼吸熵、排气中 CO 2 分压，代谢产物浓度等指标 直接控制。 （ 2 ）、非反馈控制系统 非反馈控制流加系统是不通过固定的反馈控 制参数，而通过经验或数学最大优化模型法，得到 最优流加操作曲线，从而实现流加控制。 （六）、 泡沫的影响及其控制 1 ．泡沫的影响 减少装料量 ； 造成大量逃液，增加污染的机率 ； 泡沫使菌体呼吸受阻，代谢异常或自溶。 2 ．泡沫控制 （ 1 ）培养基与工艺调整。调整培养基的成分，少加或 缓慢加易起泡的原材料；改变某些物理化学参数，如 pH ， 升高温度，减少通气和降低搅拌速率；改变发酵工艺， 如采用分次投料。 （ 2 ）菌种选育。筛选出不产生流态泡沫的菌种。 （ 3 ）机械消沫（ mechanical defoaming ） 。利用机 械强烈振动或压力变化而使泡沫破裂。 （ 4 ）化学消沫。加入消沫剂 (defoaming agent) ，降 低泡沫的液膜强度和表面黏度，使泡沫破裂。常用的消 沫剂有天然油脂类 (lipid) 、高碳醇脂肪酸 (high alcohol fatty acid) 和酯类 (ester) 、聚醚类 (polyether) 、硅酮类 (silicone) 。 （七）、发酵终点的判断 判断原则： 高产量、低成本。 以原料和发酵成本占整个生产成本为主的药品，主要在于提高 产率 （单位体积、单位时间内的产量， kg/ (hm 3 ) ）、 得率 （转化率，单位原料生产的产物量， kg 产物 /kg 原料）、 发酵系数 （单位发酵周期内的发酵体积生成的产物， kg 产物 /( 容积 m 3 周期 h) ）。 影响发酵终点判断的因素： 1 ．经济因素 发酵终点应是最低成本获得最大生产能力的时间。 2 ．产品质量 3. 生物、物理、化学指标 主要产物浓度、过滤速度、菌体形态、氨基氮、 pH 、 DO 、发酵液的外观和粘度等。 4 、特殊因素 如染菌、代谢异常等情况。 三、 灭菌操作技术 杂菌（ contaminated microbe ）： 对于发酵生