2019精选医学12核酸类药物.pptVIP

三、三氮唑核苷 （一）结构与性质 三氮唑核苷商品名 病毒唑 ，对 DNA 病毒， RNA 病 毒都有广泛作用。本品为白色结晶，熔点 174 ～ 176 ℃， 易溶于水。 这个化合物经 X 线解析 ，它的立体结构与腺苷、 鸟苷非常类似， 在体内被磷酸化成三氮唑核苷酸 ， 抑制肌苷酸脱氢酶 阻断鸟苷酸的生物合成 ，从而抑制 病毒 DNA 合成。它的另一特点是对病毒作用点多， 不易使病毒产生抗药性。 （二）生产工艺 酶合成法 使用 产气肠杆菌 ，以（ 尿苷 ） 肌苷和 TCA 为底物可以用酶法简易地合成三氮唑核苷 采用前段与后段由两个不同的酶催化，即前段使用 嘧啶核苷磷酸化酶 ，后段使用 嘌呤核苷磷酸化酶 。 四、阿糖胞苷（ Cytarabine ， Cytosine arabinoside ， Arabinosyl Cytosine ， Aracytidine ） （一）结构与性质 阿糖胞苷 又称 胞嘧啶阿拉伯糖苷 ，糖的组成部分是 阿拉伯糖 。白色或类自色结晶性粉末，无臭，易溶 于水，略溶于甲醇、乙醇中，乙醚中极微溶。 阿糖胞苷进入体内转变为阿糖胞苷酸，抑制 DNA 聚合酶， 阻止胞二磷转变为脱氧胞二磷从而抑 制 DNA 的合成 ，干扰 DNA 病毒繁殖和肿瘤细胞增殖。 只能注射 。 第十二章 核酸类药物 第一节 核酸类物质的分离提取及其发酵生产 一、 RNA 与 DNA 的提取与制备 （一） RNA 的提取与制备 1 、工业用 RNA 的提取 （ 1 ） RNA 及其工业来源 从微生物中提取 RNA 是工 业上最实际和有效的方法。一些最常见的菌体含有丰 富的核酸资源，如 酵母 、 白地霉 、多种抗菌素的 菌丝 体 —— 青霉素，制霉菌素等菌体。 通常在细菌中 RNA 占 5 ％～ 25 ％，在酵母中占 2.7 ％～ 15 ％，在霉菌中占 0.7% ～ 28 ％。 在菌体内 RNA 含量的变化受培养基组成影响，其中 关键是 铵离子浓度和磷酸盐浓度 。培养酵母菌体收率 高，易于提取 RNA 。 很显然在许多酵母中， 早期细胞中的 RNA 含量高 ， 其确切数值取决于 碳、氮比例 和培养基组成等。 （ 2 ）高 RNA 含量酵母菌株的筛选 可以从自然界 筛选 到 RNA 含量高的酵母菌株，也可用 诱变育种 的方法 提高酵母菌的 RNA 含量。 稀碱法： 是用 氢氧化钠溶液（ 1% ），使细胞壁变 性 ，使 核酸从细胞内释放出来 。需用酸中和 pH7 。然 后 除去菌体 ，将 pH 调至 RNA 的 等电点 （ pH2.5 ），使 RNA 沉 淀 出 来 。 上 法 的 缺点 是 制得 的 RNA M r 较 低 ,( 磷酸单脂酶、磷酸二脂酶降解 RNA ， 90 ℃保持 3~4h 破坏酶 ) 。 浓盐法： 是用 高浓度盐溶液（ 6%~8% ） 处理，同 时 加热 ，以 改变细胞壁的通透性 ，使 核酸从细胞内 释放出来。 要避免 分子降解 ，可采用 苯酚法 制备 RNA 。用苯 酚处理生物材料，使蛋白质变性，然后离心，上层水 溶液内含有 全部 RNA ，可用 乙醇沉淀 出来。 脱氧核糖核蛋白 溶于 浓盐溶液 1mol/L , 不溶于 0.14mol/ L, 而 核糖核蛋白 溶于 0.14mol/L 盐溶液。 （ 4 ） RNA 的提取实例：啤酒酵母是提取 RNA 的 很 好 的 资 源 。 取 100g 压 榨 啤 酒 酵 母 （ 含 水 份 70% ），加入 230ml 含 NaOH 3g 的水， 20 ℃以下缓 慢搅拌 30 分钟。用 6mol ／ L HCl 调至 pH7 ，搅拌 15 分钟，离心得清液 255m1 。冷至 10 ℃ 以下， 6mol ／ L HCl 调 pH2.5 ，置冷过夜，离心得 RNA l.8g （纯度 80 ％）。 （二） DNA 的提取与制备 1 ．工业用 DNA 的提取 取新鲜冷冻鱼精 20kg ，用绞肉机粉碎 2 次成浆状， 加入等体积水，搅拌均匀，倾入反应锅内，缓慢搅拌， 升温至 100 ℃，保温 15 分钟，迅速冷却至 20 ～ 25 ℃ ， 离心除去鱼精蛋白等沉淀物，获得 35L 含热变性 DNA 的溶液，经精确测定 DNA 含量后直接可用于 酶法降解 生产脱氧核苷酸。如要制成固体状 DNA ，