进出口动物源性食品中三聚氰胺快速检测方法—elisa编制说明.pdfVIP

《进出口动物源性食品中三聚氰胺快速检测方法 ELISA 法》编制说明 一、 标准制定的任务来源及意义 本标准的制定工作是由中 人民共和国国家认证认可监督管理 委员会提出并归口，由北京出入境检验检疫局研究起草，计划编号为 2008B184。 本标准制定了进出口动物源性食品中三聚氰胺快速检测方法 ELISA 法。 三聚氰胺（英文名 Melamine，CAS:108-78-1，分子式 C N H ）是一 3 6 6 种用途广泛的有机化工原料，禁止在食品和动物食品中添加，但因其 结构中含有多个氨基氮而被一些不法商贩添加到植物蛋白中以提高 蛋白的含量。其危害最早源于 2007 年 3 月美国发生的宠物猫、狗中毒 死亡事件。经美国 FDA 证实，猫、狗死亡是宠物食品的原料受三聚氰 胺污染，并指出其中小麦蛋白原料来自中国，由此引起了国内外对三 聚氰胺的高度关注。三聚氰胺一方面可能残留于食用动物组织，进而 污染畜产品食品；另一方面，三聚氰胺也可以直接污染小麦、大米等谷 物食品。无论何种污染途径，都可能危害人类健康、甚至造成人类中 毒、死亡的危险。2008 年 9 月 16 日，国家质检总局公布了全国婴幼儿 配方奶粉 22 家生产企业的 69 批次产品检出了含量不同的三聚氰胺的 检查结果，再次将三聚氰胺聚焦为食品安全检测中的重要检测对象。 三聚氰胺在食品中的限量值，目前仅针对乳和乳制品。对于婴幼 儿配方奶粉限量值我国和香港地区、澳大利亚、新西兰、加拿大以及 1 欧盟都制定在 1mg/kg，美国没有对婴幼儿配方奶粉制定一个控制的限 量；我国对其他乳和含乳 15%的食品限量值为 2.5mg/kg。三聚氰胺传 统的检测方法有重量法、升 法，但方法检测限不能满足要求。近来 发展起了色谱法。我国农业部发布《饲料中三聚氰胺的测定》公告，确 定了饲料中三聚氰胺测定的农业行业标准 NY/T1372-2007 ，该标准采 用高效液相色谱法（HPLC）和气相色谱-质谱联用法（GC/MS），HPLC 法最低定量限为2mg/kg，GC/MS 法最低定量限为0.05mg/kg。2008 年 10 月 7 号，国家质量监督检验检疫总局、国家标准化管理委员会批准 发布了《原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法》（GB/T 22388-2008）国 家标准，规定了高效液相色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质 谱/质谱法三种方法为三聚氰胺的检测方法，检测定量限分别为 2 mg/kg 、0.05 mg/kg 和 0.01 mg/kg。2008 年 10 月 15 日，又发布了《原 料乳中三聚氰胺快速检测 液相色谱法》（GB/T22400-2008）国家标准， 该标准的定量限为 0.3 mg/kg。 然而，尽管色谱法已经很多，但不能完成现场大量样本的检测，而 基于抗原抗体反应的免疫检测方法是一项大样本量现场快速的、准确 的、成熟的筛查检测技术。本项目是参照美国Abraxis LLC 公司建立 的动物源性食品中三聚氰胺快速检测方法-ELISA 法，制定相应的出 入境检验检疫行业标准，作为 GB/T 22388-2008 和 GB/T22400-2008 方法的补充，为实验室和现场针对动物源性食品中三聚氰胺快速筛查 2 提供检测依据，更为保障我国人民食品安全及对外出口贸易健康发展 提供有力的技术支撑。 二、 编制依据 1. 本标准是按照 GB/T 1.1-2000《标准化工作导则 第 1 部分： 标准的结构和编写的规则》、/GN/T 20001.4-2001《标准编写规则 第 4 部分：化学分析方法》及 SN/T 0001-1995《出口商品中农药、兽药残 留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定》（简称《基本规定》） 的要求编写的。 2. 本标准是经大量实验研究、评估和验证后制定的。 三、 方法概述 基于竞争性 ELISA 的原理。先用甲醇-磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液 将三聚氰胺从样品中萃取