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- 2020-07-27 发布于天津
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栏目导航 3 .如何根据凝胶珠的颜色和形状确定是否制备成功? 提示: 可以制备不含酵母细胞的凝胶珠作对照。如果制作的凝 胶珠颜色过浅、呈白色 , 说明海藻酸钠的浓度偏低 , 固定的酵母细 胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形 , 则说明海藻酸 钠的浓度偏高 , 制作失败 , 需要再做尝试。 栏目导航 [ 归纳总结 ] 1 . 实验操作流程 栏目导航 栏目导航 2 . 制备固定化酵母细胞的注意事项 (1) 在缺水状态下 , 微生物处于休眠状态。活化就是让处于休眠 状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞需要的活化时间 较短 , 一般为 0.5 ~ 1 h , 但实验时需要提前做好准备。 (2) 酵母细胞活化时体积会变大 , 因此活化前应该选择体积足够 大的容器 , 以避免酵母细胞的活化液溢出。 栏目导航 (3) 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环 , 关系到实验的 成败 , 一定要按照教材的提示进行操作。加热时要用小火 , 或者间 断加热 , 反复几次 , 直到海藻酸钠溶化为止。 (4) 海藻酸钠的浓度关系到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓 度过高 , 将很难形成凝胶珠;如果浓度过低 , 形成的凝胶珠所包埋 的酵母细胞的数目少 , 影响实验效果。 (5) 溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温 , 否则会因温度过高 而导致酵母菌死亡。 栏目导航 (6) 可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶珠 , 用作对照。 (7) 海藻酸钠胶体在 CaCl 2 这种电解质的作用下 , 发生聚沉 , 形 成凝胶珠 , 需稳定 30 min 左右。 (8) 细胞的固定化要在严格无菌的条件下进行;反复使用固定化 酵母细胞时 , 酵母菌种要纯 , 用具和材料要严格消毒 , 注意温度控 制 , 营养全面 , 还需要避免其他微生物的污染。 栏目导航 3 . 实验结果分析与评价 (1) 如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色 , 说明海藻酸钠的浓度 偏低 , 固定的酵母细胞数目较少;如果形成的凝胶珠不是圆形或椭 圆形 , 则说明海藻酸钠的浓度偏高 , 制作失败 , 需要再做尝试。 (2) 利用固定的酵母细胞发酵产生酒精 [C 6 H 12 O 6 ――→ 酶 2C 2 H 5 OH ( 酒精 ) + 2CO 2 +能量 ] , 可以看到产生了很多气泡 , 同时会闻到酒 味 , 而不含酵母菌的凝胶珠所做的对照实验则无此现象。 栏目导航 [ 典题通关 ] 下面是制备固定化酵母细胞的实验步骤,请回答下列问题。 酵母细胞的活化→配制 CaCl 2 溶液→配制海藻酸钠溶液→海藻 酸钠溶液与酵母细胞混合→固定化酵母细胞 (1) 在 ________ 状态下,微生物处于休眠状态。活化就是让处于 休眠状态的微生物重新恢复 ____________ 状态。活化前应选择足够 大的容器,因为酵母细胞活化时 __________________________ 。 栏目导航 (2) 固定化细胞技术一般采用包埋法,而固定化酶常用 ____________ 和 ____________ 。 (3) 影响实验成败的关键步骤是 ________________ 。 (4) 如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞数 目 ______ 。如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明 ______ 。 栏目导航 [ 解析 ] (1) 酵母细胞在缺水的状态下休眠。活化是加入水使酵 母细胞恢复到生活状态。酵母细胞活化后体积会增大。 (2) 固定化酶 常用化学结合法和物理吸附法固定化。 (3) 实验的关键是配制海藻酸 钠溶液 , 得到凝胶珠。 (4) 海藻酸钠浓度过低 , 包埋的酵母细胞就过 少;海藻酸钠浓度过高 , 不易与酵母细胞混合均匀。 栏目导航 [ 答案 ] (1) 缺水 正常的生活 体积增大 (2) 化学结合法 物理吸附法 (3) 配制海藻酸钠溶液 (4) 过少 海藻酸钠浓度偏高,制作失败 栏目导航 (1) 海藻酸钠溶化过程中的注意事项是什么? (2) 该实验中 CaCl 2 溶液的作用是什么? 提示: (1) 要用小火或间断加热 , 避免海藻酸钠发生焦糊。 (2) 用于海藻酸钠聚沉。 栏目导航 下图 1 表示制备固定化酵母细胞的有关操作,图 2 是利用固定化 酵母细胞进行酒精发酵的示意图。下列叙述不正确的是 ( ) 图 1 图 2 栏目导航
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