生物分离与纯化课件.pptVIP

第十三章 生物物质的分离与纯化 1 、培养液的预处理 2 、培养液的固液分离 3 、细胞的破碎 4 、生物物质的分离纯化方法 5 、生物分离工艺介绍 教 学 内 容 补充内容（一） 发酵醪 ( 发酵液 ) 的 一般特征 利用微生物发酵生产各种发酵产品，由于菌种不同和 发酵醪特性不同，其预处理方法和提取、精制方法的选择 也有差异。应针对发酵醪的特性来合理选择处理方法，大 多数发酵产物存在发酵醪中，也有少数发酵产物存在菌体 中，或发酵醪和菌体都 含有，例如四环类抗生素。各种发 酵产物无论在发酵醪或是在菌中体现往往浓度较低，并与 种种的溶解和悬浮的杂质混在一起，要分离提纯发酵产物， 首先要针对发酵醪的特性进行预处理。 发酵醪的特性一般可归纳为： 1 、 发酵醪大部分是水 ，一般含量达 90%-99%. 2 、 发酵醪中发酵产物浓度较低 ，尽管由于菌种、原料、工艺条件不同，发酵产物 于发酵醪中浓度的高低也有差异，但总的来说发酵醪中发酵产物浓度都是比较低的， 除了酒精、柠檬酸、葡萄糖酸等发酵产物浓度在 10% 以上外，其余的都在 10% 以下 ， 而抗生素的浓度更低，一般在 1% 以下 。 3 、 发酵醪中的悬浮固体物主要含有菌体和蛋白质胶状物 。由于发酵醪中存在一定 数量的菌体和蛋白质胶体物质，不仅使发酵醪粘度增加，不利于过滤，而且增加提 取和精制后工序的操作困难，在浓缩过程中变得更粘稠，同时容易产生泡沫。采用 溶媒萃取法提炼时，蛋白质的存在夺产生乳化，使溶媒相和水相分层困难；采用离 子交换法提炼时，蛋白质的存在也会增加树脂的吸附量，加重树脂的负担。 4 、发酵醪的培养基残留成分中还含有无机盐类，非 蛋白质大分子其降解产物对提取和精制均有一定的 影响。 5 、发酵醪中除了发酵产物外，常有其他少量的代谢 产物。发酵过程中除了主代谢产物外，尚伴有一些 其他的副代谢产物。这些少量的副产物，有时其结 构特性与发酵主产物极为近似，这就会给分离提纯 操作带来困难。 6 、发酵醪中还含有色素、热原质、毒性物质等有机 杂质。尽管它们的确切组成还不十分明了，但它们 对提炼影响相当大。为了保证发酵产品的质量和卫 生标准，应通过预处理将色素、热原质、毒性物质 等有机杂质先除去。 发酵成熟醪中常含有各种样的杂质，而所需要的发酵产物则 含量很少。因此，要获得纯净的发酵产物，它的提取与精制过程 便成为一个复杂而必不可少的工艺过程。提取和精制的目的在于 从发酵液中制取高纯度的、合符质量标准要求的发酵成品。 尽管由于菌种、发酵醪的特征及发酵工艺的不同，发酵产物 可以多种多样，但从工业发酵范畴来看，从发酵醪中获得产物大 致可分为三类： 发酵产物的分类 补充内容（二） 问题 1 、发酵醪有哪些特性？ 2 、发酵醪中获得产物大致可分 为 、 、 三类？ 3 、发酵液中的细胞代谢产物有哪 些？分别举出 2 个具体代表产物。 生化生产过程的最后一个环节是 把目标产物从培养液或反应液 中分离提取出来。多数生化产品在生产过程中需经微生物发酵、酶反应过 程或动植物细胞大量培养，并通过包括产物回收、粗分离、纯化及精制等 处理后，才能符合一定的质量标准。在生物产品生产过程中一般将微生物 发酵、酶反应过程或动植物细胞大量培养称为“ 上游过程 ”，而与之相应 的产物回收、粗分离、纯化及加工等后续过程就称之为“ 下游过程 ”，或 称之为生化分离和纯化过程。众所周知，要使生物技术走向产业化，必须 要上下游过程兼容、协调、以使全过程能优化进行。 鉴于生化产品具有如下特点： 目的产物在初始物料中的含量低； 含目的产物的初始物料组成复杂，除了产物外，还含有大量的细胞、代谢 物、残留培养基、无机盐等；生物活性物质的稳定性差，对 PH 、温度、 金属离子、有机溶剂、剪切力、表面张力等十分敏感，易失活、变性；生 化产品种类繁多，包括了大、中、小分子量的结构和性质复杂又各异的生 物活性物质；生化产品的应用面广，许多产品用作医药、食品、试剂等， 对含量和纯度要求高等。因此，应用于生化产品的后处理过程中的分离纯 化技术必须满足以下一些要求： ? 条件温和 ，特别对具有生物活性的物质，在后处理过程中必 须保持其生物活性； ? 分离纯化技术的选择性好 、专一性强，能从复杂的混合物中 有效地将目的产物分离出来，以达到较高的分离纯化倍数； ? 目的产物的量和活性