抑制差减杂交技术原理及常见操作的结果分析.pptVIP

抑制差减杂交技术原理 常见操作结果分析 抑制差 tion SSh是一种 高效鉴定和 因的新技 目前,该技术在分子生物学 到了广泛的应用。本文对SSH 减cDNA文库构建的技术流程 及优缺点等作了较全面的介绍,可为研究者们 提供参考 生物的生长、发育、代谢、繁殖和死亡等生命活动 都是由不同的基因表达来控制的,一般认为某一时期的表 达基因的数量约为全部基因的1.5%,所以基因的表达具有 时空性和组织特异性。研究基因的差异表达,可探究造成 生物细胞表型差异的遗传原因提供研究复杂生命过程的 基本信息。 研究差异表达基因的方法很多,如组织或特异时期的 同工酶谱分析、差减杂交( (subtractivehybridization,sH mRNA差别显示法 differentialdisplay DD)、代表性序列差 别分析( representationaldifferenceanalysis, RDA和抑制差减 杂交技术( (suppressionsubtractivehybridization,SHT。 近年来抑制差减杂交技术(SSH以其高效便捷和低假 阳性的优越性受到广大研究人员的重视,已在分子生物学 的各个领域得到了广泛的应用。 1抑制差减杂交技术原理 抑制差减杂交技术(SSH)是由 Diatchenko等建立的以抑制性PCR和 DNA差减杂交方法相结合的方法。其 依据的主要技