细胞工程总结.docVIP

★绪论： 细胞工程：是应用细胞生物学和分子生物学方法，借助工程学的实验方法或技术，在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特征，以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体有关理论和技术方法的学科。 ★第一章： 细胞全能性：一个生活细胞所具有得产生完整生物个体的潜在能力。（作为植物组织或器官的基本单位细胞，在离题培养条件下，实现分裂和分化并能发育成胚胎和完整植株的能力） 细胞分化：导致细胞形成不同结构，引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。 脱分化：培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程。 再分化：当细胞脱分化以后，无序生长的细胞及其愈伤组织要重新进入有序生长才能再生为个体的过程。 按细胞分裂能力植物细胞可分为3类：第一类始终保持分裂能力：茎尖、根尖及形成层细胞。第二类分化终端细胞，永远失去分裂能力：筛管、导管、气孔保卫细胞等特化细胞。第三类暂不分裂细胞（G0细胞）在受到外界刺激后可重新启动分裂：表皮细胞及各种薄壁细胞。 离体培养中器官发生的方式：先芽后根、先根后芽、愈伤组织的不同部位形成芽和根，在通过维管组织的联系形成完整植株。 器官分化过程：第一阶段外植体经过诱导形成愈伤组织。第二阶段是“生长中心”（即分生组织，愈伤组织中形成器官的部位）形成。第三阶段器官原基及器官形成（生长中心部位形成不同的器官原基，进而分化出相应的组织和器官）。 体细胞胚：离题培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物。 体细胞胚形成的途径：1直接途径就是从外植体某些部位直接诱导分化出体细胞胚，如：直接从子叶基部的表皮细胞或切口处产生体细胞胚。2、间接途径是在固体培养中外植体先形成愈伤组织，再分化发育产生体细胞胚；悬浮培养中先产生胚性细胞团再形成体细胞胚。 与器官发生形成个体的途径相比，体细胞胚发育再生植株的特点：一是体细胞胚具有双极性，二是体细胞胚形成后与母体的维管束系统联系较少，即出现生殖隔离现象。 体细胞胚的特点：1、起源于非合子细胞2、双极性细胞能同时允许根芽发生3、存在生殖隔离4、经历类似合子胚发育的各种胚共四个发育阶段5、遗传稳定变异相对较小6、由性细胞发育而来 ★第二章; 离体培养条件下遗传变异的特点：普遍性、局限性、嵌合性、生理适应性。 影响体细胞遗传与变异的因素：1供体植物（原有的倍性水平在培养细胞多倍化过程中起着重要作用）2培养基及培养方式（培养方式、激素以及其他附加成分均会诱导体细胞变异的发生）3继代培养的次数（继代时间越长继代次数愈多细胞变异的概率就越高）。 ★第三章： 实验室的组成：基本实验室，辅助实验室，实验室布局。其中基本实验室分为准备室（进行一切与实验有关的准备工作）接种室（进行材料的离体无菌操作）培养室（对离体材料进行控制条件下的培养）。辅助实验室又分细胞学实验室和生化分析实验室。 基本设备配置：常规设备（天平、冰箱、酸度计、离心机、加热器、纯水器、分装设备）、灭菌设备（高压蒸汽灭菌锅、干热消毒柜、过滤灭菌装置、喷雾消毒装置、紫外灯）、无菌操作设备（净化工作台、接种箱）、培养设备（培养架、培养箱、摇床、生物反应器）、其他设备。 灭菌技术：培养基灭菌（高压蒸汽灭菌或过滤灭菌）玻璃器皿灭菌（湿热和干热灭菌）金属用具灭菌（使用前干热灭菌使用中浸泡在70%的酒精中，再以火焰将酒精烧去，冷却）操作环境灭菌（气体熏蒸或紫外线照射） 培养基成分：无机盐类、有机化合物、生长调节物质、水、其他附加成分。 外植体：指用于离体培养的活的植物组织，器官等材料。 外植体的来源有三种：生长在自然环境下的植物、有目的地培养在温室控制条件下的生长的植物、无菌环境下已经经过离体培养的植物。 培养基组成：1、无机盐类：大量元素、微量元素；2、有机化合物：糖类、维生素、肌醇、腺嘌呤、氨基酸、其他复合成分；3、生长调节物质：生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类；4、水；5、其他附加成分：琼脂、活性炭。 外植体灭菌选择：1、种子灭菌；2、芽，叶片，茎等组织材料灭菌；3、未成熟胚，子房，及花药灭菌。注意：灭菌后的材料应立即接种培养，否则会造成二次污染。 ★第四章： 快速繁殖：利用细胞的再生特性，在组织培养条件下加速繁殖材料的个体生产提高繁殖系数 植物脱毒和快繁的意义：1能够有效保持优良品种特性2生产无病毒种苗，防止品种退化3快速繁殖新品种，加速优良品种推广4节约耕地，提高农产品商品产出率5便于运输 离体繁殖：在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖的技术。 立体繁殖的一般技术环节：1无菌培养物的建立2培养物的增殖3器官分化4植株的形成和移栽 培养基的增殖方式：芽增殖，不定芽增殖，胚状体的增殖，愈伤组织增殖。 增值方式的选择：首先选择茎芽增殖，其次是不定芽，除非万不得已不宜选择愈伤组织增值方式。 花药培养：把发育到一