空心莲子草致病菌假隔链格孢菌原生质体的制备与再生.pdfVIP

空心莲子草致病菌假隔链格孢菌原生质体的制备与再生.pdf

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第 41 卷 第 2 期 植 物 保 护 学 报 Vol .41 No.2 2014 年 4 月 ACTA PHYTOPHYLACICA SINICA Apr . 2014 空心莲子草致病菌假隔链格孢菌原生 质体的制备与再生 1 1 2 1 周凤艳 张 勇 周振荣 刘小林 (1.安徽省农业科学院 ,植物保护与农产品质量安全研究所 ,合肥 230031; 2. , 243100) 当涂县农业技术推广中心 安徽 当涂 : Nimbya alternantherae , 摘要 为建立空心莲子草致病菌假隔链格孢菌 的原生质体提取体系 以其强 致病性野生型菌株 N.alternantherae11-2 为供试菌株 ,研究了不同菌龄 、酶系统 、酶解时间及稳渗剂 , PEG , 等对假隔链格孢菌原生质体制备及再生的影响 并采用聚乙二醇 介导转化法 构建了随机插 入突变体库 。结果表明 ,在酵母浸出粉胨葡萄糖液体培养基中培养 2 d 的假隔链格孢菌丝体 ,以 0. 7 M , 2% 、2% 2% 3 , 30 ℃ 山梨醇为稳渗剂 同时使用 裂解酶 崩溃酶和 蜗牛酶 种酶的混合液 在 下 3 h , 。 酶解 能获得足量的原生质体 且其再生率也可满足后继转化试验的要求 关键词 :假隔链格孢菌 ;原生质体 ;突变体 Preparation and regeneration of protoplasts for alligator weed pathogen Nimbya alternantherae 1 1 2 1 Zhou Fengyan Zhang Yong Zhou Zhenrong Liu Xiaolin (1.Institute of Plant Protection and Aro- Pr

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