【图文】微生物的实验室培养(公开课).doc

二、稀释涂布平板法： 1、梯度稀释菌液： 稀 释 103 倍 2、涂布平板： 稀 释 104 倍 稀 释 105 倍 问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合 平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步 应如何进行无菌操作？ 应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养 皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒 精灯火焰周围等等。 例、平板划线法和稀释涂布平板法接种大肠杆菌的操 作中，相同的是（ C ） ①可以用相同的培养基 ②都需要使用接种针进行接 种 ③菌液均需稀释后再接种④都可以用来计数活菌⑤ 依据的原理相同⑥都需要在火焰旁进行接种 A．①② B．③④ C．①⑥ D．②④ 课题成果评价 1、培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2d后无菌落生 长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 2、接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致， 并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的； 如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作 还未达到要求，需要分析原因，再次练习。 3、是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同 课题的延伸 菌种的保存： 1、临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌 落长成后置于4℃冰箱保藏。以后每3-6个月 ，都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新 鲜的培养基上。这种方法保存的时间不长， 菌种易被污染和产生变异。 2、长期保存：甘油管藏法。在3ml的甘油瓶中，装入1ml甘 油后灭菌。将1ml培养的菌液转移到甘油瓶中，与甘油充分 混匀后，放在-20℃的冷冻箱中保存。