坏死性肠炎对肉鸡EGC分泌因子的影响及双歧杆菌抗病效果的研究.pdf

中文摘要 目的：本试验主要研究了由A 型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防 由A 型产气荚膜梭菌引起肠炎肠组织学变化；建立 A 型产气荚膜梭菌感染模型，试验分为 对照组、感染组和预防组；采用免疫组化方法检测三组肠神经胶质细胞分泌因子 GFAP 、 NT-3 的表达、用ELISA 方法检测三组肠中 IL-6 、IFN-ɑ 炎性细胞因子的表达变化。 方法：本实验选择 A 型产气荚膜梭菌(ATCC13124)作为病原菌；将 120 只 1 日龄肉鸡 随机分为 3 组，试验组 1 是对照组，饲喂基础日粮；试验组 2 是感染组，饲喂基础日粮， 灌服喂 1.0×108CFU/mlA 型产气荚膜梭菌液 1ml；试验组 3 是预防组，饲喂基础日粮，灌服 8 8 1.0×10 CFU/ml 产气荚膜梭菌液 1ml，饲喂4% 的双歧杆菌粉（活菌数均不低于 10 CFU/g ）。 选择 7、14、21d ，分别从对照组、感染组和预防组随机选取 5 只鸡，进行采样。取十二指 肠、空肠、回肠、盲肠 6cm 左右，取出其肠道内容物，将肠放入 10%甲醛中固定，制作石 蜡切片，用 HE 染色方法检测 A 型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由 A 型产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎的病理变化；取十二指肠、空肠、回肠、盲肠 6cm 左右， 4% 的多聚甲醛固定组织，制作石蜡切片，采用免疫组化方法检测由A 型产气荚膜梭菌引起 的肉鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由 A 型产气荚膜梭菌引起肉鸡肠炎中肠神经胶质细胞分 泌因子 GFAP、NT-3 的表达；取肠新鲜组织，碾磨离心，采用ELISA 方法检测由 A 型产气 荚膜梭菌引起的肉鸡鸡肠炎以及使用双歧杆菌预防由产气荚膜梭菌引起的肉鸡肠炎中 IL-6 、IFN-α 的表达变化。 结果：1.肠病理变化：对照组鸡肠绒毛比较完整，没有出血现象；感染组肠绒毛结构不 完整，绒毛固有层中有明显的出血，绒毛断裂，脱落；预防组肠绒毛比较完整，结构正常。 2.肠神经胶质细胞分泌因子 GFAP、NT-3 的表达：肉鸡肠中GFAP 在感染组粘膜上皮、 肠腺、固有层、肌层、粘膜层、粘膜下层表达；对照组、预防组在粘膜上皮、肠腺、固有 层表达，肌层、粘膜层、粘膜下层弱表达，阳性表达总分感染组高于预防组、对照组，预 防组高于对照组。NT-3 对照组在粘膜上皮、固有层、肌层、粘膜下层、粘膜层弱表达；感 染组在粘膜上皮、粘膜下层、粘膜层、固有层、肌层强表达；预防组在粘膜上皮、固有层、 肌层、粘膜下层、粘膜层、肌层表达；阳性表达总分感染组高于预防组，预防组高于对照 组。 3.IL-6、IFN-ɑ 表达变化：肉鸡感染组肠中 IL-6 表达量高于对照组、预防组，差异极显 著（P0.01) ，对照组的表达量高于预防组，差异不显著（P0.05) ，几乎在同一水平；肉鸡 感染组肠中 IFN-ɑ 表达量高于对照组、预防组，差异显著（P0.05) ，预防组的表达量高于 对照组，差异不显著（P0.05) ，几乎在同一水平。 结论：在由 A 型产气荚膜梭菌引起鸡肠炎中，肠神经胶质细胞分泌因子 GFAP、NT-3 的表达总分高于于对照组、预防组，双歧杆菌预防由 A 型产气荚膜梭菌引起的肠炎有一点 的效果；肠细胞因子IL-6 、IFN-ɑ 表达量高于对照组、预防组，预防组、对照组的表达量基 II 本在同一个水平，双歧杆菌预防由 A 产气荚膜梭菌感染引起的鸡肠炎有一定效果，降低了 肠道中细胞因子 IL-6 、IFN-ɑ 的表达量，对A 型产气荚膜梭菌有抑制作