第九章亲和技术的应用.pdf

第二节 亲和技术的应用 第九章 第一节 第二节 金属离子亲和层析 有机染料亲和层析 拟生物亲和层析 （Biomimetic AFC） 第九章 第一节 第二节 2 （一）、金属螯合亲和层析 将环氧活化型Sepharose 6B与金属螯合剂偶联， 再用金属离子溶液处理制成金属螯合亲和层析 柱。 金属螯合剂:亚氨二醋酸、氨基水杨酸、8-羟基 喹啉、羧甲基氨基酸等 . 第九章 第一节 第二节 3 蛋白质上的氨基酸残基，如组氨酸的咪唑 基、半胱氨酸的巯基和色氨酸的吲哚基， 利于蛋白质与固定化金属离子结合。 金属离子如锌和铜。 第九章 第一节 第二节 4 吸附：pH在6~8 。 洗脱：降低pH值、增加离子强度、或在缓冲液中 加5mmol/L EDTA等方法。 特点： 蛋白质吸附容量大； 价格便宜； 具有普遍适用性。 第九章 第一节 第二节 5 （二）、有机染料亲和层析 + 有机染料具有类似于NAD 的结 构。 需核苷酸类物质为辅酶的酶， 对染料具有一定亲和力。 染料共价偶联到琼脂糖载体上， 能制得亲和层析柱。 染料亲和层析已成功的分离纯 化了多种酶。 第九章 第一节 第二节 6