胚胎和配子生物工程课件.pptVIP

JXLAB ? 收集到的冲冼液，需静置 10min ，使胚胎下沉到容器底 部，然后移去上清液，再放于解剖镜下检查胚胎的数量 和发育情况，再将发育正常的胚胎收集到注射器或移植 管内供移植用。 ? 胚胎的检查项目： 1. 受精卵整体的形态和体积大小； 2. 透明带形状，厚度及损伤程度； 3. 发育正常胚胎的卵裂球应该具有整齐的外形，大小一 致，分布均匀而紧密，发育速度与胚龄一致； 4. 卵细胞表面颗粒的状态和多少等。 4. 胚胎的检查 JXLAB 4 、胚胎质量鉴定 ? 牛胚胎大小直径约为 0.15-0.16mm （第七天） ? 一般分为 A 、 B 、 C 三个等级 ? A 级：胚胎形态完整，轮廓清晰，分裂球大小均匀，结 构紧凑，无附着的细胞和液泡或很少； ? B 级：轮廓清晰，色调及细胞密度好，可见到一些附着 的细胞和液泡； ? C 级：轮廓不清晰，色调发暗，结构较松散，游离的细 胞和液泡较多。 JXLAB 时 期 天 数 早期桑椹胚（ EM ） 发情后 5-6 天采集的胚胎 桑椹胚（ M ） 6 天胚胎 致密桑椹胚（ CM ） 6-7 天胚胎 早期囊胚（ EBL ） 7 天胚胎 囊胚（ BL ） 7-8 天胚胎 扩张囊胚（ EXBL ） 8-9 天胚胎 孵化囊胚（ HBL ） 9 天胚胎 目前，胚胎的发育阶段采用以下系统来划分 JXLAB JXLAB 牛的异常胚胎示意图 JXLAB 1 ～ 2 级牛胚胎 JXLAB JXLAB JXLAB 6 天收集的胚胎（未拣） JXLAB 二细胞至四细胞胚胎 JXLAB JXLAB JXLAB JXLAB JXLAB JXLAB ? 胚胎的降温：使胚胎停止发育，延长其体 外生存时间 ? 体外培养：将胚胎置于体温条件下，在培 养液中，使其继续发育 ? 胚胎冷冻：通过一定的处理程序，将胚胎 降温冷冻后，保存于液氮中 5. 胚胎的保存 JXLAB 6 、胚胎冷冻 ? 胚胎冷冻的难点： 冷冻液的毒副损伤 降温过程的冷冻损伤 ? 三步平衡冷冻法 胚胎分别用含 3% 、 6% 、 10% 甘油且含 10% 牛血清 的 PBS 液的保存液浸渍 5 分钟后，用含 10% 甘油的 PBS 装管冷冻。 ? 一步法冷冻 胚胎用含 10% 血清的乙二醇溶液平衡后直接冷冻 JXLAB JXLAB 牛胚胎冷冻程序示意图 胚胎和配子生物工程 (1) (Embryonic and gametal bioengineering) JXLAB 9.1 概述 ? 一、 胚胎移植的含义 胚胎移植技术 — ET （ embryo transfer ） 胚胎移植： 将一头良种母畜（供体）配种后的早期胚胎 取出，移植到另一头 同种 （受体）的 生理状态相同 的 母畜体内，使胚胎继续发育成为新个体，俗称借腹怀 胎。 JXLAB . 提供胚胎的个体为 “供体”，接受胚 胎的个体为“受 体”，不管供体还 是受体动物 都应为 雌性个体。 JXLAB 2 、胚胎移植的意义 ? ①、大大提高优良母畜的使用效率； ? ②、缩短世代间隔，大大提高品种改良的速度； ? ③、通过冷冻胚胎进口，可实现更有利的种畜遗传物质 的跨国界交换； ? ④、有利于防疫工作； ? ⑤、可以克服不孕； ? ⑥、利用胚胎冷冻保存品种资源。 ? ⑦、是发展家畜生物技术重要的研究手段。 JXLAB JXLAB 胚胎移植的实质 胚胎移植实质上是早期胚胎在 相同生理环境条件下空间位置 的转换，而 胚胎本身的遗传物 质并不发生改变， 因此各种性 状均能 保持其原来的优良特性 。 JXLAB 为什么胚胎移植能成功 ? ? 移动到任何一头动物子宫内都能发育吗 ? ? 同种动物发情排卵后 , 在一段时间内供体 \ 受体具 有相同的生理环境 ? 为什么能收集到胚胎 ? ? 早期胚胎一定时间内处于游离状态 ? 供体和受体会不会发生排斥 / ? 同种动物之间基本上不排斥 ? 为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性 ? ? 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系 , 但遗传特 性不受受体的影响 . 生 理 学 基 础 JXLAB 3 、家畜胚胎移植的发展历史 ? ①、 1890 首次实现了