基因工程的基本操作程序最终.pptxVIP

1-2：基因工程的基本操作程序;;;;;一、目的基因的获取;（一）从基因文库中获取目的基因; 部分基因组文库;cDNA文库和基因组文库的对比 ;2.基因文库的构建方法;;目的基因的mRNA;上述三种目的基因提取的方法有何优缺点？;如何从基因文库中得到所需要的基因？;已知目的基因序列时;;① 概念：PCR全称为_______________，是一项 在生物____复制___________的核酸合成技术 ;⑥过程：;1、目的： ;2、 基因表达载体的组成：;二、基因表达载体的构建——核心;;;1、将目的基因导入植物细胞的方法： （1）农杆菌转化法 ①农杆菌特点：;③过程：;（2）基因枪法 （3）花粉管通道法;2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： ; 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点：繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法：感受态细胞法（Ca2+处理法） ;四、目的基因的检测与鉴定;（一）、检测;归纳步骤;DNA分子杂交示意图 ;4、个体生物学水平鉴定;归纳步骤;归纳: 基因工程的基本操作程序;练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （1）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处，DNA连接酶作用于 处。（填“a”或“b”）;练习1：(2008理综山东卷)为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （2）将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。 （3）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术，该技术的核心是 和 。 （4）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测，又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。;答案：（1）a a （2）基因枪法（花粉管通道法） （3）植物组织培养（1分） 脱分化（去分化） 再分化 （4）耐盐基因（目的基因） 一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中） ;;三、将目的基因导入受体细胞;三、将目的基因导入受体细胞;;;;3．聚合酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述30多次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55 ℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72 ℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是(　　) A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B．复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D．PCR与细胞内DNA复制相比所需酶的最适温度较高 ;4．(2011年重庆高二检测)下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是(　　) A．需要限制酶和DNA连接酶 B．必须在细胞内进行 C．抗生素抗性基因可作为标记基因 D．启动子位于目的基因的首端;;1、有时候读书是一种巧妙地避开思考的方法。五月-20五月-20Thursday, May 28, 2020 2、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。19:48:5419:48:5419:485/28/2020 7:48:54 PM 3、越是没有本领的就越加自命不凡。五月-2019:48:5419:48May-2028-May-20 4、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。19:48:5419:48:5419:48Thursday, May 28, 2020 5、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。五月-20五月-2019:48:5419:48:54May 28, 2020 6、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。28 五月 20207:48:54 下午19:48:54五月-20 7、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。。五月 207:48 下午五月-2019:48May 28, 2020 8、业余生活要有意义，不要越轨。2020/5/28 19:48:5419:48:5428 May 2020 9、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息。7:48:54 下午7:48 下午19:48:54五月-20 10、你要做多大的事情，就该承受多大的压力。5/28/2020 7:48:54 PM19:48:5428-五月-20 11、自