植物生理学 实验8 植物抗逆性的鉴定.pptVIP

实验九 高温胁迫对植物 细胞膜的伤害 1. 实验目的 ■ 学习电导仪法测定膜相对透性的方法 ■ 理解逆境对植物膜透性的影响 ? 植物细胞膜起调节控制细胞内外物质交换的作用，它的选 择透性是其最重要的功能之一。 ? 当植物受到逆境影响时，如高温或低温，干旱、盐渍、病 原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜的透性增加，选择透性 丧失，细胞内部分电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电 导率增大。 ? 膜结构破坏的程度与 逆境的强度 、 持续的时间 、 作物品种 的抗性等因素有关。因此，质膜透性的测定常可作为逆境 伤害的一个生理指标，广泛应用在植物抗性生理研究中。 2. 实验原理 ? 当质膜的选择透性被破坏时细胞内电解质外渗，其中包括 盐类、有机酸 等，这些物质进入环境介质中，如果环境介 质是蒸馏水，那么这些物质的外渗会使蒸馏水的导电性增 加，表现在电导率的增加上。植物受伤害愈严重，外渗的 物质越多，介质导电性也就越强，测得的电导率就越高 （不同抗性品种就会显示出抗性上的差异。） ? 本实验采用电导率法测定电解质的相对外渗率，来了解胁 迫情况下植物受害的程度。 伤害率 ? 本次实验测定高温对植物细胞膜的伤害 ? 电导率 K= G Q ? Q: 电极常数（电导仪本身决定） ? G: 实测电导值 ? 伤害率（％） ＝ 处理电导率 煮沸电导率 × 100 ％ 3 材料、仪器设备及试剂 （一）材料：梧桐叶片； （二）仪器设备： 1. 电导仪； 2. 打孔器； 3. 真空干燥器； 4. 恒温水浴锅； 4 实验步骤 1) 打取叶圆片：自选叶片，洗净吸干，避开叶脉打取 30 个叶圆片 , 放入 1 支试管 , 再打取 30 个叶圆片 , 放入另 1 支试管 , 依此类推 , 每支试管皆放 入 30 个叶圆片； 2) 试管分别编号为： 1A,1B, 2A,2B ……5A,5B ，每管加入 15ml 纯水 , 抽真空 15min ； 3) 水浴处理： 5 组 (1A1B,2A2B ……5A5B) 分别在 60 ℃ 水浴 0 ， 10 ， 20 ， 30 ， 40min ，取出后用自来水冷却 10 分钟； 高温处理 时间（ min ） 0 10 20 30 40 重复 1 管号 1A 2A 3A 4A 5A 重复 2 管号 1B 2B 3B 4B 5B 4) 测量电导率 ：用电导仪测定浸泡溶液的电导率（分组单独 领取电导仪，详细使用方法分组指导）； 5) 煮沸电导率 ：测过电导率的 10 支试管再放入 100 ℃ 沸水浴 中 15min ，以杀死植物细胞，使细胞内溶物全部泄露出来， 取出试管后用自来水冷却 10min ，测其煮沸电导率。 电导仪的使用方法 ? 电源开关“开”，预热； ? 打开（测量 / 校正）拨至“测量”；（补偿 / 一般）拨至 “一般”；（× 1/ × 10 -2 ）拨至“× 1” ；量程范围选 “× 10 3 ” ，使待测值介于 0.1 ～ 0.999 之间。 ? 每次往待测液中插入电极时，都要首先用纯水冲洗电极， 并用吸水纸轻轻拭干。 电导值 A B 处理电导率 平均值 C t 煮沸电导率 平均值 C 100 伤害率 （ C t ／ C 100 ） × 100 0 10 min 20 min 30 min 40 min 5 数据记录与处理 表 1 高温对叶片伤害率的影响