PINK1-parkin途径激活线粒体自噬对糖尿病大鼠七氟烷后处理心肌保护作用的影响.pdf

目 录 中文摘要 Ⅰ 英文摘要Ⅲ 常用缩写词中英文对照表Ⅴ 前 言1 1 材料与方法3 1.1 实验材料3 1.2 实验方法5 1.3统计学处理9 2 结 果11 2.1大鼠一般情况11 2.2 血流动力学指标11 2.3 血清cTnI浓度12 2.4 心肌缺血区和梗死区面积13 2.5 心肌病理变化14 2.6 parkin蛋白表达14 3 讨 论16 4 结 论18 参考文献19 综 述22 致 谢31 个人简介32 山西医科大学硕士学位论文 PINK1-parkin途径激活线粒体自噬对糖尿病大鼠七氟烷后处理 心肌保护作用的影响 摘要 目的： 研究PINK1-parkin 通路激活的线粒体自噬对糖尿病大鼠七氟烷后处理心肌保护 作用的影响，寻找糖尿病大鼠七氟烷后处理对心肌缺血再灌注损伤 （MIRI）的心肌 保护作用消失的原因，以期为治疗该疾病提供可能的方法。 方法： 选取健康SD 大鼠，体重位于230-300g 之间，全部为成年雄性，单次腹腔注射 1%链脲佐菌素 （STZ）50mg/kg 制备糖尿病大鼠模型。将造模成功的50 只大鼠按随 机数字表法分为5组 （n 10)，分别为假手术组 （sham 组）、心肌缺血再灌注组 （IR 组）、心肌缺血再灌注+七氟烷后处理组 （ISev 组）、心肌缺血再灌注+BAM15 组 （IB 组）、心肌缺血再灌注+BAM15 组+七氟烷后处理 （IBSev 组）。IR 组、ISev 组、IB 组、IBSev 组结扎冠状动脉左前降支 （LAD），30min 后松开缝线行120min 再灌注 以构建心肌缺血再灌注模型。Sham 组只穿线，不进行MIRI。ISev 组和IBSev 组于再 灌注前1min 开始吸入2.5%七氟烷，持续6min。IB 组和IBSev 组于缺血前1h 腹腔注 射1mg/kgBAM 15，其他三组同时间注射相同体积二甲基亚砜 （DMSO）。比较各组 大鼠在缺血前 （T ）、再灌前 （T ）、再灌后 （T ）的HR、SBP、MAP；再灌注完 0 1 2 成后取血测量血清cTnI 浓度；TTC 染色法测量各组心肌缺血、梗死面积占比；HE 染色观察心肌细胞形态；Westernblot 法测量parkin 蛋白表达水平。 结果： IR 组、ISev 组、IB 组血流动力学指标在T 、T 、T 依次下降，IBSev 组T 时有 0 1 2 2 所回升，但仍小于T ；IR 组、ISev 组、IB 组和IBSev 组大鼠心肌缺血面积占比没有 0 I 山西医科大学硕士学位论文 明显差异；与sham 组相比，各组T 时HR、SBP、MAP 降低，心肌细胞结构被破坏， 2 血清cTnI 浓度、心肌梗死面积占比和parkin 蛋白表达升高；与IR 组相比，ISev 组以 上指标无明显差异，IB 组和IBSev 组心肌损伤指标有所好转。与IB 组相比，IBSev 组HR、SBP、MAP 上升，血清cTnI、心肌梗死面积占比下降，parkin 蛋白表达未见 明显差异。 结论： 七氟烷后处理对糖尿病大鼠MIRI 心肌保护作用消失，其原因可能与线粒体自噬 被抑制有关，激活PINK1-parkin 途径恢复线粒体自噬水平可部分恢复其保护作用。 关键词：糖尿病；七氟烷后处理；心肌缺血再灌注损伤；PINK1-parkin 途径 II 山