ACTN-4基因在口腔鳞状细胞癌表达及对SCC15细胞凋亡的影响研究.pdf

山西医科大学（博）硕士学位论文 目 录 中文摘要I Abstract III 常用缩写词中英文对照表V 前 言 1 1 材料与方法3 2 结 果 13 2.1 ACTN-4 基因在口腔鳞状细胞癌表达 13 2.1.1qPCR 结果 13 2.1.2 HE 染色及免疫组化结果 13 2.2 ACTN-4 对 SCC15 细胞的影响 14 2.2.1 转染效果 14 2.2.2 si-ACTN-4 对 SCC15 细胞增殖的影响 15 2.2.3 si-ACTN-4 对 SCC15 细胞凋亡的影响 16 2.2.4 si-ACTN-4 对 SCC15 细胞凋亡相关蛋白及 PI3K/AKT 信号通路的影响 17 3 讨 论 18 4 结 论21 参考文献22 综 述27 致 谢38 个人简介39 IV 山西医科大学（博）硕士学位论文 ACTN-4 基因在口腔鳞状细胞癌表达及对SCC15 细胞凋亡的 影响研究 中文摘要 目的： 探讨 ACTN-4 在口腔鳞状细胞癌组织表达及抑制其表达对癌细胞增殖、凋亡 的影响。 方法： qPCR 检测 ACTN-4 在口腔鳞状细胞癌组织中的 mRNA 表达；免疫组化检测 ACTN-4 在口腔鳞状细胞癌组织蛋白表达情况；将口腔鳞状细胞癌 SCC15 细胞 分为空白组（细胞无特殊的处理）、NC 组（细胞中转染脂质体 2000 及 NC siRNA ） 及 si-ACTN-4 （细胞中转染脂质体 2000 及设计合成的 ACTN-4 特异性 siRNA ）， Western blotting 检测转染 siRNA 48h 后细胞 ACTN-4 、Bcl-2 、Bax 、AKT 和 p-AKT 表达，流式细胞术检测细胞凋亡率；MTT 法检测转染 siRNA 24h、48h 和 72h 的 细胞增殖情况。 结果： （1）ACTN-4 在口腔鳞癌组织 mRNA 表达明显高于癌旁组织 （P ＜0.05 ）。 （2 ）ACTN-4 定位于口腔癌细胞的胞浆或胞膜，以胞浆或胞膜中呈现出明 显的黄色或棕褐色的阳性细胞，其阳性细胞表现出弥漫性分布； （3 ）ACTN-4 特异性 siRNA 转染 SCC15 细胞 48h 后，si-ACTN-4 组 ACTN-4 蛋白表达明显低于空白组 （P ＜0.05 ）。 （4 ）si-ACTN-4 转染 SCC15 细胞 24h ，si-ACTN-4 组细胞 OD 值与空白组 比较差异无统计学意义（P ＞0.05 ），si-ACTN-4 转染 SCC15 细胞 48h 和 72h ， si-ACTN-4 组细胞 OD 值与空白组比较差异有统计学意义（P ＜0.05 ）。 （5 ）si-ACTN-4 转染 SCC15 细胞 48h ，si-ACTN-4 组细胞凋亡率明显高于 空白组 （P ＜0.05 ）。 （6 ）si-ACTN-4 转染 SCC15 细胞 48h ，与空白组比较，si-ACTN-4 组 p-AKT 和 Bcl-2 表达明显降低，Bax 表达明显升高（P ＜0.05 ），三组间 AKT 蛋白表达 I 山西医科大学（博）硕士学位论文 差异无统计学意义（P ＞0.05 ） 结论： ACTN-4 在口腔鳞癌组织中阳性表达，抑制ACTN-4 表达可明显降低口腔鳞 癌 SCC15 细胞增殖，诱导口腔鳞癌SCC15 细胞凋亡，下调 p-AKT 和 Bcl-2 表达，