沉默NDC80基因对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响.pdf

目 录 摘 要 I Abstract III 常用缩写词中英文对照表V 前 言 1 1 材料与方法 2 1.1 实验材料 2 1.1.1 细胞系2 1.1.2 主要试剂2 1.1.3 主要仪器3 1.2 实验方法 4 1.2.1 细胞复苏4 1.2.2 细胞培养4 1.2.3 细胞冻存4 1.2.4 基于 NDC80 的 siRNA 合成 5 1.2.5 细胞分组及转染 5 1.2.6 细胞计数5 1.2.7 检测 NDC80 的mRNA 表达 6 1.2.8 CCK-8 实验 6 1.2.9 细胞平板克隆形成实验7 1.2.10 Transwell 迁移小室实验7 1.2.11 Transwell 侵袭小室实验7 1.2.12 蛋白质印迹法检测 NDC80 及相关蛋白 8 1.2.13 统计学分析 9 2 结 果 10 2.1 siRNA 沉默 NDC80 基因的效果评价 10 2.2 沉默 NDC80 表达抑制胆囊癌细胞 GBC-SD、NOZ 的增殖能力 11 2.3 沉默 NDC80 表达抑制胆囊癌细胞 GBC-SD、NOZ 的迁移和侵袭能力 12 2.4 沉默 NDC80 表达后胆囊癌细胞 GBC-SD、NOZ 周期及凋亡相关蛋白表达 水平改变 13 2.5 沉默 NDC80 表达后胆囊癌细胞 GBC-SD、NOZ 侵袭及 EMT 相关蛋白表达 水平改变 14 3 讨 论 16 3.1 胆囊癌的治疗现状 16 3.2 NDC80 在肿瘤细胞 中的研究现状 16 3.3 NDC80 对胆囊癌细胞的影响 17 3.3.1 NDC80 对胆囊癌细胞增殖能力的影响 17 3.3.2 NDC80 对胆囊癌细胞迁移和侵袭能力的影响 17 3.4 研究不足与展望 18 4 结 论 19 4.1 沉默 NDC80 抑制胆囊癌细胞的增殖能力 19 4.2 沉默 NDC80 抑制胆囊癌细胞的迁移和侵袭能力 19 4.3 NDC80 有望成为一种新型胆囊癌治疗的分子靶标 19 参考文献20 综 述 23 致 谢 28 个人简历29 山西医科大学硕士学位论文 沉默 NDC80 基因对胆囊癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响 摘 要 目的：胆囊癌是消化系统的高度恶性肿瘤。近年来其发病率显着增加，胆囊癌诊治 方面的研究仍然没有较大的突破。少部分早期患者有机会通过手术得以根治，而大 部分患者因晚期或不能耐受手术错失了根治机会，被迫选择姑息性治疗方案 。目前 临床上尚无公认统一的放、化疗法方案，介入疗法对于生存质量 的提高也不够 明显。 因此，胆囊癌的预防和早期的诊断变得意义重大，通过在基因水平上探索胆囊癌的 发病机制并寻找其分子靶标，成为胆囊癌诊治方面的重要研究方向。NDC80 是一种 异四聚体蛋白复合物，参与细胞的有丝分裂过程 。近年来一些研究发现其异常表达 可引起基因组不稳定。进而可促进肿瘤发生。但 NDC80 在胆囊癌 中的作用机制尚不 清楚 。本文研究的目的是通过体外实验研究 NDC80 对胆囊癌细胞增