生物化学实验课件.pptx

生物化学实验课件;概 述 ;实验内容; 生物化学实验技术 郭蔼光 郭泽坤 主编 高等教育出版社 生物化学实验方法与技术 陈毓荃 主编 科学出版社 ;蛋白质的两性性质和等电点测定; 蛋白质是两性电解质。蛋白质分子中可解离基团除N-端α-氨基与C-端 羧基外，还有肽链上某些氨基酸残基的侧链基团，如Phe、Thr、Ser的 羟基、Cys的巯基、Arg的胍基、His的咪唑基，Asn、Gln的酰胺基和 Lys的ε-氨基等都能解离为带电基团。 在蛋白质溶液中存在着下列平衡： 阴离子 两性离子 阳离子 pH＞pI pH = pI pH＜pI 电场中： 移向阳极 不移动 移向阴极 调节溶液的pH使蛋白质分子的酸性解离与碱性解离相等，即所带正负电荷相等，净电荷为零，此时溶液的pH值称为蛋白质的等电点(pI)。 在等电点时，蛋白质溶解度最小，溶液的混浊度最大。配制不同pH的缓冲液，观察蛋白质在这些缓冲液中的溶解情况即可大致确定蛋白质的等电点。在pH梯度电泳中，蛋白质泳