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- 2020-08-22 发布于浙江
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第九章 核酸类药物的分析;基本要求;第一节 概述;什么是核酸?;核酸;
;核苷酸;;核苷酸;戊糖;核苷;DNA RNA;;类别;稀有碱基;鸟嘌呤;二、理化性质;(四)变性和复性
1.变性:在某些理化因素影响下,DNA双螺旋区的氢键断裂和碱基堆积力破坏,有规律的双螺旋结构变成单链无规律的“线团”,但不发生共价键的断裂,这过程称之。
变性原因:高温(一般>75℃)、强氧化剂、强酸、碱、尿素等;
机理:双链间氢键断开,成为两条单链( DNA双螺旋二级结构的破坏,生物活性的丧失)
特征性Tm---DNA的变性温度 82~95℃;2.复性
一定条件下,去除变性因素后,核酸恢复二级结构及生物活性的现象;通常使用热复性。(退火);(五)颜色反应
苔黑酚反应:
RNA中核糖+浓HCl(浓H2SO4)→糠醛+苔黑酚→深绿色化合物( λmax=670nm )
二苯胺反应:
DNA中脱氧核糖+浓H2SO4 →5-羟基-4-羰基戊醛+二苯胺→蓝色化合物( λmax=595nm )
水解后磷酸:
磷酸+钼酸→磷钼酸+还原剂(维生素C、氯化亚锡等) →钼蓝( λmax=660nm )
;第二节 嘌呤类核苷酸药物分析;一、鉴别;(一)戊糖的鉴别;(二)嘌呤的鉴别;(三)磷酸的鉴别;(四)特征吸收光谱;(五)熔点测定;二、检查;三、含量测定;四、实例分析;(一)肌苷的质量分析;3.鉴别
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