体内药物分析 手性药物HPLC法.pptx

第10章 手性药物的 高效液相色谱拆分法; 偏振光和比旋光度;;结论： 物质有两类：; 旋光仪 polarmeter： 定量测量液体或溶液的旋光程度的仪器;;具有镜像与实物关系的一对旋光异构体。;对映体的命名 R\S命名原则; 手性药物的现状（现代药物分析选论，安登魁）; 同时，手性也是生物体系的基本特征。人体内糖的构型为D-构型，氨基酸为L-构型，因此，内源性的大分子物质如蛋白质、酶、载体、受体、糖蛋白、多糖、核酸等都具有手性特征。; 手性药物的药理作用是通过与体内大分子之间的严格手性匹配与分子识别而实现的，也就是在人体内药物通过与具有特定物理形态的受体反应起作用。药物的两种立体异构体中，只有一种更适合与受体或活性部位结合，从而抑制（或激动）该大分子的生理活性，达到治疗的目的。; 手性药物与生物体系相互作用具有立体选择性，可引起药理学差异，即药理学立体选择性。药理学立体选择性分为药效学立体选择性(stereoselectivity in pharmacodynamics)和药代动力学立体选择性(stereoselectivity in pharmacokine-tics)。;手性药物光学异构体的药理作用大致有以下5种类型： ①一种光学异构体无治疗活性。 ②生物活性强度不同的光学异体。 ③生物活性强度相等的光学异构体。 ④生物活性类型不同的光学异构体。 ⑤生物活性相反的光学异构体。 ;反应停所引起的不良反应;(S)-thalidomide 致畸; 美国FDA 1992发布了手性药物指导原则。要求所有在美国上市的消旋体类新药，生产者均需提供报告，说明药物中所含的对映体各自的药理作用、毒性和临床效果。欧共体国家及日本、加拿大等国随后也规定了类似的法规。2006年1月，我国SFDA也出台了相应的政策法规。这意味着化合物中如果存在一个手性中心，申请消旋药物时至少得做3组药理、临床数据，无疑研究费用和工作量相应加大。如果开发的是光学纯的手性药，只需做一组试验即可。随着拆分技术和不对称合成技术的发展，选择光学纯药物开发要更合算一些。 ; 自从1992年美国FDA开始要求手性药物以来，手性药物在研发的新药中所占比例逐年增加，据市场统计1993年单一对映体药物的销售额为350亿美元，2000年全球销售额达到1 330亿美元，预计2008年达到2 000亿美元。 手性药物以单纯对映体形式上市，可减少治疗总剂量，减少药物间相互作用，消除无活性对映体的毒性。 合成手性药物的方法主要有化学合成法和生物合成法两种。; 上世纪60年代初，科学家们开始研究在极少量的手性催化剂作用下获得大量的单旋体，这就是手性合成技术。最初只获得了3%的收率，经过近三十年的努力终于获得了成功。目前最高的产率已经接近100%，特别需要指出的是这种技术可以使人们随心所欲地合成自然界中不存在的左旋体或右旋体。; 因此，若以消旋体药物给药，在研究药物对映体的药效、毒性及药动学性质时，应分别对单个光学异构体进行测定。如果采用传统、非立体选择性药物分析方法测定生物体液中药物对映体，以评价其药理行为，会得出不全面甚至错误的结论。所有这些都要求建立高专属性、高灵敏度、高分离度的对映体拆分和测定方法。; 对映体化合物之间除了偏振光的偏转方向不同外，其他理化性质完全相同，因而在非手性环境中基本无法分离。;第二节 手性分析的方法;1.衍生化反应注意事项：;2.常用衍生化试剂的种类;（3）羧酸衍生物类 主要包括酰氯与磺酰氯类、酸酐类和率甲酸酯类。它们的手性碳位于羧基的α位，可与胺、氨基酸及醇类药物反应生成非对映异构体衍生物。;手性衍生化法的特点;;;;色谱条件 色谱柱：Hypersil C18, 5 ? m, 150?5.0 mm ID， 流动相：乙腈?水-乙酸-三乙胺(55 : 45 : 0.1 : 0.02，v/v)， 流速： 1 ml/min, 检测波长：254 nm;酮洛芬对映体衍生化物色谱图;二、直接法;提供手性环境，通过手性识别进行分离;（一）手性流动相法 CMP 在流动相加入手性添加剂（CMPA），使其与待测物形成非对映异构体复合物，根据其形成复合物的稳定常数的不同而得以分离。;1.环糊精添加剂;2.手性离子对色谱法;特点; β-环糊精手性流动相添加剂法拆分佐匹克隆对映体 徐颖 药学进展 2006 第9期; 手性固定相是在色谱柱的担体上加上高光学纯度的手性异构体制作而成。采用手性固定相的HPLC法可以直接、快速、有效、简便地分离大多数手性物质对映体。;1.电荷