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紫外可见分光光度计 基本知识 北京普析通用仪器有限责任公司 General Instrument Co, Ltd 紫外-可见分光光度法 紫外-可见吸收光谱 朗伯-比耳定律 紫外-可见分光光度计 分析条件的选择 测定方法 紫外-可见分光光度法 (ultraviolet-visible spectrophotometry, UV-VIS 它是利用物质的分子或离子对某一波 长范围的光的吸收作用,对物质进行定性 分析、定量分析及结构分析,所依据的光 谱是分子或离子吸收入射光中特定波长的 光而产生的吸收光谱 按所吸收光的波长区域不同,分为紫 外分光光度法和可见分光光度法,合称为 紫外-可见分光光度法 紫外-可见分光光度法的特点 1与其它光谱分析方法相比,其仪器设备和 操作都比较简单,费用少,分析速度快; 2灵敏度高; 3选择性好; 4精密度和准确度较髙; 5用途广泛。 紫外-可见吸收光谱 1.物质对光的选择性吸收 物质对光的吸收是选择性的,利用 被测物质对某波长的光的吸收来了解物 质的特性,这就是光谱法的基础。 通过测定被测物质对不同波长的光的吸 收强度(吸光度),以波长为横坐标,吸光 度为纵坐标作图,得出该物质在测定波长范 围的吸收曲线。 在吸收曲线中,通常选用最大吸收波长 ma进行物质含量的测定。 影响紫外-可见吸收光谱的因素 物质的吸收光谱与测定条件有密切的 关系。测定条件(温度、溶剂极性、pH 等)不同,吸收光谱的形状、吸收峰的位 置、吸收强度等都可能发生变化。 1.温度在室温范围内,温度对吸收光谱 的影响不大。 2.溶剂 注意如下几点: (1)尽量选用低极性溶剂; 2)能很好地溶解被测物,并且形成的溶 液具有良好的化学和光化学稳定性; (3)溶剂在样品的吸收光谱区无明显吸收。 3.pH值 朗伯-比尔定律 吸光度和透光度 设入射光强度为I,吸收光强度为L透 射光强度为L,反射光强度为I,则 由于反射光强度很弱,其影响很小,上式 可简化为 吸光度:为透光度倒数的对数,用A表示, A=lg1/T=lglo/It 透光度:透光度为透过光的强度I与入射光 强度I0之比,用T表示: 即T=Io