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流式细胞术原理及应用 Miltenyi biote MACS  一、什么是流式细胞术? 流式细胞仪的构造 二、怎样设计流式实验? 、流式实验中涉及到的关键步骤 四、常见流式细胞术应用 Miltenyi biote MACS  、流式细胞术基本概念 流式细胞术( Flow Cy tometry)是对于处在快速直线 流动中的细胞和生物颗粒进行多参数、快速的定量分 析和分选技术 研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生物及人工合 成微球等 对生物颗粒的物理参数及生物学特性进行定性和定量 分析 Miltenyi biote MACS  L  流式细胞仪构造图 1 PMT 3 Dichro Flow cell PMT 2 - PMT 1 Laser Filters Miltenyi biote MACS  流式细胞仪五大系统 流动室与液流驱动系统 激光光源及光束成形系统 ·光学系统 信号检测与分析系统 细胞分选系统 Miltenyi biote MACS  流动室与液流驱动系统 1.空气加压进样 2蠕动泵精确定量进样 流动室,430×180um,鞘液 Injector Fluorescens Focused Miltenyi biote MACS  激光光源与光束成形系统 1.氩离子气体激光器,22×66un 2固体激光器 onm 488nm.561nm.635nm Miltenyi biote MACS  光学系统 透镜、滤光片、小孔; LP: long-pass filter SP: short-pass filter BP: band-pass filter 460,500540 Miltenyi biote MACS  信号检测与分析系统 物理参数 SC:前向角散色光,代表细胞大小 SSC:侧向角散色光,代表细胞颗粒度 中性拉细胞 激光0 前向角散射 只 单细 淋巴细胞 侧向角散射 Miltenyi biote MACS