（优质课件）质谱技术在临床微生物检验中的应用.pptVIP

实验室使用心得：成本低，快速，鉴定结果准确，性价比高。 优点1：可以聚类分析，即同源性的研究，在耐药上有优势。 优点2：可以建立库中没有的细菌的数据库，有地域性的数据库。 * 三大特点： 准确 快速 性价比高 * 安图生物Autof ms1000 MALDI-TOF 革命性 * 临床微生物 兽医微生物 食品微生物（食品安全与质控） 环境微生物监测 质谱的应用领域 * （二）、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪MALDI-TOF MS 的组成 飞行时间质量 检测器（TOF） 基质辅助激光解吸 电离离子源（MALDI） 数据库 MALDI-TOF MS 主机 * （三）、MALDI-TOF MS 的原理 基本原理是将样品分散在基质分子中并形成晶体。当用激光照射晶体时，基质从激光中吸收能量，样品解吸附，基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离，电离的样品在电场作用下飞过真空的飞行管，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测，即通过离子的质量电荷之比（M/Z）与离子的飞行时间成正比来分析离子，从而测得并绘出样品分子的质谱图。 * 蛋白质是生命的物质基础。不同的细菌或不同疾病的样品，其蛋白质的种类和含量不同。不同的蛋白质解析后形成的多肽片段的种类、数量和分子量也不一样，因而在一定的条件下，在电离空间的运动速度和距离不同。用质谱仪将各种蛋白质解析后在电离空间的运动速度和距离的轨迹记录和描绘下来，则会形成不同的曲线图形。 * * （四）、操作简便 * 样品靶板 细菌与基质 飞行管 检测器 质谱图 真空系统 样品靶板 入口 几秒钟即可得到结果 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱 (MALDI-TOF MS) * MALDI-TOF MS蛋白质指纹特征 * MALDI TOF检测 挑取部分菌落点样至靶板 加基质液 生成图谱 搜库鉴定 质谱检测流程 * 鉴定结果 显示绿色并且分数 最高的为该样品的 鉴定结果。 * Bruker的结果报告： 得分范围 分数的解释 2.300-3.000 highly probable species identification 完全可靠地鉴定到种的水平 2.000-2.299 secure genus identification, probable species identification 可靠鉴定到属的水平，有可能鉴定到种的水平 1.700-1.999 probable genus identification 有可能鉴定到属的水平 0.000-1.699 no reliable identification 没有可信的鉴定结果 AnalyteName Organism(best match) Score Organism(second best match) Score Sample1 Pseudomonas aeruginosa 19955 1 CHB 1.906 Pseudomonas aeruginosa DSM 1117 DSM 1.881 Sample2 Proteus mirabilis DSM 18254 DSM 1.774 no reliable identification 1.631 Sample3 Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae 9295 1 CHB 2.064 Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae DSM 30104T HAM 1.994 Sample4 Enterobacter cloacae MB11506-1_CHB 2.299 Enterobacter cloacae 13159_1 CHB 2.072 优点：直接可以打印 缺点：目前没有做接口连接到实验室的LIS系统 * *