DNA提取过程及原理.pdfVIP

. DNA 提取过程及原理 一、实验原理 从细胞中分离得到的 DNA 是与蛋白质结合的 DNA ，其中还含有大量 RNA ，即核糖核 蛋白。如何有效地将这两种核蛋白分开是技术的关键。 盐溶法是提取 DNA 的常规技术之一。在制备核酸时，通常是用研磨破坏细胞壁和细胞 膜，使核蛋白被释放出来。利用 DNA 不溶于 0.14mol/L 的 NaCl 溶液而 RNA 能溶于 0.14mol/L 的 NaCl 溶液这一性质可以将 DNA 核蛋白和 RNA 核蛋白从样品破碎细胞液中分 开。 分离得到核蛋白后，还需进一步将蛋白等杂质除去。去除蛋白的方法有 3 种：① 用含 辛醇或异戊醇的氯仿振荡核蛋白溶液，使其乳化，然后离心除 去变性蛋白质。用这种方法 处理时，蛋白质停留在水相和氯仿相中间，而 DNA 则溶于上层水相，用两倍体