实验三 DNAFeulgen染色法.pptVIP

实验三DNA的 Feulgen染色和 细胞有丝分裂相的观察 DNA是主要的遗传物质,主要分布在核的染色质或有丝 分裂过程中出现的染色体内。自从1924 Feulgen等人建 立了 DNA-Feulgen染色方法以来至今这种方法仍是DNA 定量测定的主要染色方法之一。 实验目的 1了解 Feulgen反应的基本原理。 2熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能和操作方法。 3掌握细胞分裂各期的主要特点。 实验原理 DNA经弱酸(1 mol/LHCL)水解 其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的 键打开,使脱氧核糖的一端形成 秦 游离的醛基,这些醛基在原位与 Schiff试剂(无色品红亚硫酸溶液 反应,形成紫红色的化合物,使 ve to the chromosomes of this onion 细胞内含有DNA的部位呈紫红色 metaphase of mitosis at the time it was fixed (By Ed 紫红色的产生,是由于反应产物的分子内含有醌基, 醌基是一个发色团,所以具有颜色。对照组预先用热三氯 醋酸或DNA酶处理,抽提去细胞中的DNA而得到阴性反 应,从而证明了 Feulgen反应的专一性。 、试剂 1. Carnoy固定液:3份95%酒精加入1份冰醋酸。 2.1mol/LHCL:准确量取86.2m浓盐酸(比重1.18)加入 到93.8m1蒸馏水中 3. S